Anti-GALNT3 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14435

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: GALNT3-Funktion und Lokalisierung

• GALNT3 kodiert für die Polypeptid-N-Acetylgalactosaminyltransferase 3 (GalNAc-T3), ein Typ-II-Membranprotein, das die Mucin-Typ-O-Glykosylierung initiiert, indem es N-Acetyl-D-Galactosamin (GalNAc) auf Serin- oder Threoninreste von Zielproteinen überträgt.
• Katalysiert den ersten entscheidenden Schritt in der Biosynthese O-verknüpfter Oligosaccharide, eine Modifikation, die für Proteinstabilität, Sekretion und Zelloberflächeninteraktionen entscheidend ist. Verwandte Referenzen: PMID:16638743, PMID:31932717, PMID:8663203
• Substrate umfassen das HIV-Hüllglykoprotein gp120, EA2, MUC2, MUC1A, MUC5AC, Fibronectin und den Fibroblasten-Wachstumsfaktor 23 (FGF23), was auf vielfältige Rollen bei der Modifikation von Virushüllen, Mucinproduktion, Matrixbiologie und Phosphatstoffwechsel hindeutet. Verwandte Referenzen: PMID:8663203, PMID:9295285, PMID:16638743, PMID:31932717
• Die Glykosylierung von FGF23 durch GALNT3 ist für die Sekretion von intaktem FGF23 essentiell; Loss-of-Function-Mutationen verursachen die hyperphosphatämische familiäre tumorale Calcinose (HFTC) und das Hyperostose-Hyperphosphatämie-Syndrom. Verwandte Referenzen: PMID:16638743, PMID:31932717
• Befindet sich in der Golgi-Stapelmembran, was mit seiner Rolle bei der posttranslationalen Modifikation innerhalb des sekretorischen Wegs übereinstimmt.
• Die Gewebeexpression ist in sekretorischen Drüsen enthaltenden Organen – Bauchspeicheldrüse, Haut, Niere und Hoden – am höchsten, mit niedrigeren Werten in Prostata, Ovar, Darm, Kolon, Plazenta und Lunge.
• Enthält eine Transmembranhelix, eine Stammregion und tandemartige katalytische und Lektindomänen; benötigt Mangan für die Aktivität und unterliegt alternativem Spleißen und Selbstglykosylierung.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen (aa 43–160) befindet sich in der N-terminalen Stamm-/katalytischen Region; die polyklonale Natur ermöglicht wahrscheinlich den Nachweis unter denaturierenden und nativen Bedingungen, was es mit WB, IHC-P, IF/ICC und ELISA kompatibel macht.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~73 kDa; aufgrund gewebespezifischer Glykosylierung können Bandenverschiebungen auftreten. Ziehen Sie in Betracht, Pankreas- oder Nierenlysate als positive Kontrollen zu verwenden und Deglykosylierungsenzyme zur Bestätigung der Spezifität einzusetzen.
• Bei IHC-P und IF/ICC ist mit einem starken Signal in Bauchspeicheldrüse, Haut, Niere und Hoden zu rechnen. Optimieren Sie die Antigen-Demaskierung und Blockierung für jeden Gewebetyp und validieren Sie mit einer relevanten Negativkontrolle.
• Für ELISA verwenden Sie ein passendes Antikörperpaar, das eine nicht überlappende Epitoperkennung ermöglicht, um Wettbewerb zu vermeiden. Bestätigen Sie die Detektion von rekombinantem GALNT3-Protein als Standard.
• Obwohl kreuzreaktiv mit Maus und Ratte, überprüfen Sie bei geplanten Speziesvergleichen die Sequenzidentität innerhalb der Immunogenregion; führen Sie artspezifische IgG-Kontrollen durch, um unspezifische Bindung auszuschließen.
• Als polyklonale Präparation kann die Charge-zu-Charge-Konsistenz variieren. Für kritische quantitative Assays validieren Sie jede neue Charge mit Ihrem spezifischen Proben-System neu.

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