Anti-GABRD polyklonaler Kaninchen-Antikörper für WB, ELISA - O14764

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: GABRD-Funktion und Lokalisierung

• Die Gamma-Aminobuttersäure-Rezeptor-Untereinheit Delta (GABRD) ist eine Untereinheit der heteropentameren GABA(A)-Rezeptoren, bei denen es sich um ligandenabhängige Chloridkanäle handelt, die durch den wichtigsten inhibitorischen Neurotransmitter GABA gesteuert werden. Bei Aktivierung ermöglichen GABAARs selektiv den Chloridionenfluss und vermitteln so eine schnelle inhibitorische synaptische Übertragung. Zugehörige Referenzen: PMID:35355020
• Als Delta-Untereinheit befinden sich GABRD-haltige Rezeptoren vorwiegend an extrasynaptischen oder perisynaptischen Positionen, insbesondere im Hippocampus und in den Körnerzellen des Kleinhirns, und tragen zur tonischen GABAergen Inhibition bei, wodurch die neuronale Erregbarkeit reguliert wird.
• Der GABA(A)-Rezeptorkomplex besteht aus fünf Untereinheiten, die um eine zentrale Pore angeordnet sind; die GABA-Bindungsstellen befinden sich an den Schnittstellen der Alpha-Beta-Untereinheiten. GABRD bildet wahrscheinlich mit Alpha- und Beta-Untereinheiten funktionelle Kanäle.
• GABRD ist ein Transmembran-Glykoprotein mit einer Disulfidbrücke und unterliegt einer Phosphorylierung, was durch seine Annotation als Glykoprotein und Phosphoprotein angezeigt wird.
• Subzellulär lokalisiert GABRD an der Zellmembran, was mit seiner Rolle als Ionenkanalrezeptor übereinstimmt.
• Funktionelle Studien zeigen, dass Alpha-4-Beta-3-Delta-GABAARs gleichzeitig GABA und Histamin binden können, wobei die Histaminbindung an der Schnittstelle zweier benachbarter Beta-Untereinheiten erfolgt, was möglicherweise den Schlaf-Wach-Rhythmus reguliert. Zugehörige Referenzen: PMID:35355020
• Klinisch sind Mutationen in GABRD mit Epilepsie und anderen Krankheitsvarianten assoziiert, was seine Bedeutung für die neurologische Funktion unterstreicht.
• GABRD ist auch unter alternativen Namen wie GABA(A)-Rezeptor-Untereinheit Delta und den Gen-Aliasen EJM7, EIG10, GEFSP5 bekannt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 31-248 des humanen GABRD abdeckt und der extrazellulären N-terminalen Domäne entspricht. Dieses Design zielt auf eine Region ab, die im nativen Rezeptor zugänglich ist und möglicherweise für den Nachweis sowohl von denaturiertem als auch von nativem Protein geeignet ist.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 51 kDa; aufgrund von Glykosylierung und anderen posttranslationalen Modifikationen kann die beobachtete Bande jedoch bei einem höheren scheinbaren Molekulargewicht wandern. Erwägen Sie die Verwendung von Deglykosylierungsenzymen, falls eine präzise Größenbestimmung erforderlich ist.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit GABRD der Ratte, was auf eine Sequenzhomologie in der Immunogenregion zwischen Mensch und Ratte hindeutet. Forscher können die Kreuzreaktivität mit anderen Spezies basierend auf dem Sequenzabgleich ebenfalls bewerten.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Antikörper potenziell als Fänger- oder Nachweisreagenz für rekombinantes GABRD-Protein oder angereicherte Rezeptorpräparate verwendet werden. Titration und Pufferoptimierung werden empfohlen.
• Angesichts der Rolle von GABRD bei der tonischen Inhibition kann dieser Antikörper nach entsprechender Validierung in der Immunhistochemie oder Immunozytochemie nützlich sein, obwohl in den Produktspezifikationen nur WB und ELISA aufgeführt sind; alternative Anwendungen erfordern eine individuelle Optimierung.

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