Anti-GABARAP polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - O95166

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von GABARAP

• GABARAP (Gamma-Aminobuttersäure-Rezeptor-assoziiertes Protein), auch bekannt als MM46 oder ATG8A, ist ein Ubiquitin-ähnlicher Modifikator aus der ATG8-Familie.
• Es spielt eine entscheidende Rolle beim intrazellulären Transport von GABA(A)-Rezeptoren und deren Interaktion mit dem Zytoskelett. Zugehörige Referenzen: PMID:9892355
• GABARAP ist für eine spätere Phase der Autophagosomenreifung essenziell und unterscheidet sich dadurch funktionell von LC3-Proteinen, die an der Verlängerung des Phagophors beteiligt sind. Zugehörige Referenzen: PMID:15169837, PMID:20562859, PMID:22948227
• Es wird für die lokale Aktivierung des CUL3(KBTBD6/7)-E3-Ubiquitin-Ligasekomplexes benötigt, reguliert den Abbau von TIAM1 sowie die nachgeschaltete RAC1-Signalübertragung und beeinflusst dadurch die Zellmigration und -proliferation. Zugehörige Referenzen: PMID:25684205
• GABARAP ist durch Interaktionen mit TEX264 und UBAC2 an der selektiven Autophagie des endoplasmatischen Retikulums (Retikulophagie/ER-Phagie) beteiligt und wurde mit Apoptose in Verbindung gebracht. Zugehörige Referenzen: PMID:31006538, PMID:15977068, PMID:39284914
• Auf subzellulärer Ebene lokalisiert sich GABARAP an den Membranen von Autophagosomen, an zytoplasmatischen Vesikeln, der Membran des Golgi-Apparats und am Zytoskelett.
• Die Gewebeexpression ist breit gefächert, mit hohen Spiegeln in Herz, Gehirn, Plazenta, Leber, Skelettmuskulatur, Niere und Bauchspeicheldrüse.
• GABARAP ist ein lipidierter Ubiquitin-ähnlicher Modifikator, der sich an Autophagosomenmembranen verankert, um seine Funktionen auszuführen.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid erzeugt, das den Aminosäuren 1-100 des humanen GABARAP entspricht. Für den Western Blot (WB) sollten Zell- oder Gewebelysate verwendet werden, von denen bekannt ist, dass sie GABARAP exprimieren, beispielsweise Proben aus Gehirn oder Herz, wobei eine Bande bei etwa 14 kDa erwartet wird. Zur Bestätigung der Spezifität sollte eine Validierung im jeweiligen Probensystem durchgeführt werden.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) sollten die Bedingungen für die Antigen-Rückgewinnung optimiert und geeignete positive sowie negative Kontrollgewebe verwendet werden, da GABARAP breit exprimiert wird.
• Für ELISA sollte bei Verwendung im Sandwich-Format die Kombination mit einem Fangantikörper in Betracht gezogen und der Test mit rekombinantem GABARAP-Protein oder Zelllysaten durchgeführt werden.
• Aufgrund der hohen Homologie zwischen den Mitgliedern der GABARAP-Familie sollte eine Kreuzreaktivität mit GABARAPL1 oder GABARAPL2 untersucht werden, wenn die Spezifität entscheidend ist.
• Der Antikörper wird als polyklonaler Kaninchenantikörper geliefert. Nach Erhalt bei -20°C lagern und wiederholte Einfrier-Auftau-Zyklen vermeiden.

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