Anti-FXR/NR1H4 Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – Q96RI1

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von FXR/NR1H4

• FXR (NR1H4) ist ein ligandenaktivierter Kernrezeptor, der als Gallensäuresensor fungiert. Er wird durch primäre und sekundäre Gallensäuren aktiviert, darunter Chenodesoxycholsäure (CDCA), Lithocholsäure, Desoxycholsäure (DCA) und Allocholsäure (ACA). Zugehörige Referenzen: PMID:10334992, PMID:10334993, PMID:21383957
• Er reguliert die hepatische Gallensäurehomöostase durch Steuerung von Genen, die an Synthese, Konjugation, Transport und Entgiftung beteiligt sind. Zum Beispiel reprimimiert er CYP7A1 und CYP8B1 indirekt über NR0B2/SHP, aktiviert SLC27A5/BACS und BAAT für die Konjugation und induziert ABCB11/BSEP, ABCC2/MRP2, ABCB4 und SLC10A1/NTCP für den Transport. Zugehörige Referenzen: PMID:12754200, PMID:15471871, PMID:17895379, PMID:10514450, PMID:15239098, PMID:16269519
• Im Darm fördert FXR die Expression und Sekretion von FGF19, das zur Leber signalisiert und CYP7A1 reprimimiert. Dadurch wird die intestinale Gallensäuremessung mit der hepatischen Synthese verknüpft. Zugehörige Referenzen: PMID:12815072, PMID:19085950
• FXR moduliert den Lipidstoffwechsel durch Regulation von Genen wie SREBF1 (Lipogenese), PLTP (HDL-Bildung), SCARB1 (HDL-Aufnahme), APOE, APOC1, APOC4, PPARA (Fettsäureoxidation), VLDLR, SDC1 (LDL/IDL-Aufnahme), MTTP (VLDL-Assemblierung), APOC2 (Triglycerid-Clearance), APOA1, ANGPTL3 und APOC3 (Inhibitoren der Triglycerid-Clearance). Zugehörige Referenzen: PMID:12554753, PMID:12660231, PMID:15337761, PMID:11579204, PMID:11927623, PMID:21804189, PMID:12891557
• Er trägt zur Glukosehomöostase bei, indem er die hepatische Glukoneogenese unterdrückt und Insulinsekretion sowie -sensitivität moduliert. Zugehörige Referenzen: PMID:20447400
• FXR wirkt antiinflammatorisch in Leber und Darm, reguliert die Expression proinflammatorischer Zytokine herunter und vermittelt die Trans-Repression von TLR4-induzierten Zytokinen durch eine sumoylierungsabhängige Verhinderung der N-CoR-Freisetzung von Zielgenpromotoren. Zugehörige Referenzen: PMID:21242261, PMID:19864602
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen (z. B. FXRalpha1 und FXRalpha2) mit unterschiedlicher Gewebsverteilung: Die Leber exprimiert überwiegend FXRalpha1-Isoformen (Isoformen 3 und 4), während Darm und Niere überwiegend FXRalpha2-Isoformen (Isoformen 1 und 2) exprimieren. Diese Isoformen weisen eine unterschiedliche Empfindlichkeit gegenüber Gallensäureliganden und unterschiedliche Profile der Zielgenaktivierung auf.
• FXR lokalisiert überwiegend im Zellkern, wo er als Heterodimer mit RXR an Response-Elemente bindet. Er unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung und Sumoylierung, die seine transkriptionelle Aktivität und Proteininteraktionen feinabstimmen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 1–230) des humanen FXR/NR1H4, wodurch die Erkennung mehrerer Isoformen ermöglicht wird. Für die Western Blotting sind mehrere Banden zu erwarten, die den angegebenen Proteingewichten von 48, 54, 55 und 56 kDa entsprechen; es wird empfohlen, geeignete Positivkontrollen und Molekulargewichtsmarker einzusetzen.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) wird eine Validierung in Geweben mit bekannter FXR-Expression wie Leber oder Darm empfohlen. Bedingungen für die Antigenrettung und Antikörperverdünnung sollten empirisch für den spezifischen Probentyp optimiert werden.
• ELISA kann zum Screening oder zur Quantifizierung von FXR in Zelllysaten oder rekombinanten Proteinpräparationen verwendet werden. Eine anwendungsbezogene Optimierung des Assayformats und der Antikörperkonzentration wird empfohlen.
• Bei Arbeiten mit Maus- oder Rattenproben bestätigen Sie die Kreuzreaktivität im jeweiligen experimentellen System, da für den Antikörper eine Kreuzreaktion mit beiden Arten angegeben ist.

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