Anti-FOXO1 Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q12778

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von FOXO1

• FOXO1 (Forkhead box protein O1, auch bekannt als FKHR oder FOXO1A) ist ein Transkriptionsfaktor der Forkhead-Box-Familie mit einem Molekulargewicht von ca. 70 kDa (vorhergesagt 69,7 kDa).
• Es wirkt als Hauptziel des Insulinsignals und reguliert die metabolische Homöostase als Reaktion auf oxidativen Stress (PubMed:10358076, PubMed:12228231, PubMed:15220471). Zugehörige Referenzen: PMID:10358076 PMID:12228231 PMID:15220471
• FOXO1 bindet an das Insulin-Antwortelement (IRE) und das Daf-16-Familien-Bindungselement (DBE), um die Transkription von Zielgenen zu modulieren, und seine Aktivität wird durch Insulin unterdrückt (PubMed:10358076). Zugehörige Referenzen: PMID:10358076
• Zu den Schlüsselfunktionen gehört die Förderung der Glukoneogenese in Hepatozyten durch Zusammenarbeit mit PPARGC1A und CEBPA (PubMed:17024043), die Kontrolle der Redoxbilanz und der Knochenmasse sowie die Regulation der Osteoblastenzahl und der chondrogenen Determination (gemäß Ähnlichkeit). Zugehörige Referenzen: PMID:17024043
• FOXO1 ist ein wichtiger Regulator des Zelltods, der die Apoptose in Nervenzellen (PubMed:18356527), kardialen glatten Muskelzellen (PubMed:19483080) und den autophagievermittelten Zelltod (PubMed:20543840) fördert. Zugehörige Referenzen: PMID:18356527 PMID:19483080 PMID:20543840
• Die subzelluläre Lokalisation ist dynamisch: FOXO1 pendelt zwischen Zytoplasma und Kern als Reaktion auf posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung und Acetylierung.
• Es ist reichlich in Skelettmuskel und Ovar exprimiert, mit niedrigeren Gehalten in Herz, Plazenta, Lunge, Leber, Bauchspeicheldrüse, Milz, Hoden und Dünndarm, und schwache Expression in Gehirn, Thymus, Prostata und Dickdarm (PubMed:9479491). Zugehörige Referenzen: PMID:9479491
• FOXO1 unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung, Methylierung und Ubiquitinierung, die seine transkriptionelle Aktivität und Stabilität modulieren.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 340–580 innerhalb der C-terminalen Regulationsregion von FOXO1, die kritische Phosphorylierungs- und Acetylierungsstellen enthält; daher kann dieser Antikörper sowohl Gesamt- als auch modifizierte Formen nachweisen. Erwägen Sie eine Validierung mit Phosphatase- oder Deacetylierungsbehandlung bei der Untersuchung spezifischer Modifikationszustände.
• Für Western Blot (WB) ist eine Bande bei ~70 kDa zu erwarten; schließen Sie Positivkontrollen wie HeLa-, HepG2- oder Skelettmuskellysate ein, da FOXO1 in diesen Geweben stark exprimiert ist.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunozytochemie (IF/ICC) lokalisiert sich FOXO1 sowohl im Zytoplasma als auch im Kern, wobei die nukleäre Translokation durch oxidativen Stress oder Serumhunger gefördert wird. Optimieren Sie Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen, um die endogene Lokalisation zu erhalten.
• Für ELISA erwägen Sie die Paarung mit einem Detektionsantikörper, der auf ein anderes Epitop abzielt, um die Spezifität zu erhöhen; bestätigen Sie die Leistung mit rekombinantem FOXO1-Protein.
• Als Kaninchen-polyklonaler Antikörper kann es zu Chargenvariabilität kommen; für kritische Experimente wird eine unabhängige Validierung durch siRNA-vermittelten Knockdown oder ein blockierendes Peptid empfohlen.

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