Anti-FN1 Kaninchen Monoklonaler Antikörper für WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA – P02751

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Fibronektin

• Fibronektin ist ein hochmolekulares Glykoprotein, das an Zelloberflächen und verschiedene Komponenten der extrazellulären Matrix bindet – darunter Kollagen, Fibrin, Heparin, DNA und Aktin. Es ist essenziell für Zelladhäsion, Migration, Opsonisierung, Wundheilung und die Erhaltung der Zellmorphologie. Verwandte Referenzen: PMID:3024962, PMID:3593230, PMID:3900070
• Fibronektin wirkt als Ligand für den LILRB4-Rezeptor und hemmt dadurch die FCGR1A/CD64-vermittelte Monozytenaktivierung. Verwandte Referenzen: PMID:34089617
• Es ist an der Kompaktion von Osteoblasten und der Regulation der Ablagerung von Kollagen Typ I beteiligt, was für die Knochenmineralisierung entscheidend ist (gemäß Ähnlichkeit).
• Das Protein liegt aufgrund von alternatives Spleißen als mehrere Isoformen vor: Plasmafibronektin (lösliches Dimer), das von Hepatozyten sezerniert wird, und zelluläres Fibronektin (dimer oder multimer), das als Fibrillen von Fibroblasten und anderen Zelltypen abgelagert wird. Gewebespezifische Expression umfasst Netzhaut und Urin.
• Subzelluläre Lokalisation: Sezerniert in den extrazellulären Raum und die extrazelluläre Matrix.
• Ein internes Fragment, Anastellin, bindet an Fibronektin, um die Bildung von Superfibronektin mit verbesserten Adhäsionseigenschaften zu induzieren, und hemmt Tumorwachstum, Angiogenese und Metastasierung.
• Fibronektin, das von kontrahierendem Muskel sezerniert wird, fördert die Leberautophagie und systemische Insulinsensibilisierung über die ITGA5:ITGB1-Integrin-Signalübertragung.
• Schlüsselwörter: Akute Phase, Alternatives Spleißen, Angiogenese, Zelladhäsion, Disulfidbindung, Glykoprotein, Heparin-bindend, Oxidation, Phosphoprotein, Wiederholung, Sezerniert, Signal, Sulfatierung.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 2205–2477 im C-terminalen Bereich des humanen Fibronektins (Isoform 1), einschließlich der Heparin-bindenden Domäne und eines Teils der Fibrin-bindenden Region. Dieses Design kann die Detektion von vollständigen Fibronektin und bestimmten Spleißvarianten, die dieses Segment enthalten, begünstigen.
• Bei der Western Blotting können mehrere Banden bei ca. 72 kDa, 74 kDa und 221–272 kDa beobachtet werden, was wahrscheinlich proteolytische Fragmente sowie vollständige oder multimere Formen widerspiegelt. Optimieren Sie die Probenvorbereitung und reduzierende Bedingungen, um Abbau zu minimieren.
• Bei der Immunhistochemie und Immunfluoreszenz berücksichtigen Sie Antigen-Retrieval-Methoden und Fixierungsbedingungen; Fibronektin ist ein reichlich vorhandenes ECM-Protein, daher kann ein Hintergrund eine Blockierung mit Serum oder BSA erfordern.
• Für ELISA und Immunpräzipitation validieren Sie den Antikörper mit rekombinanten Fibronektin-Standards oder bekannten Positivkontrollen, um Sensitivität und Spezifität zu bestätigen.

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