Anti-Fibroblasten-Aktivierungsprotein-α (FAP) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q12884

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Fibroblast Activation Protein Alpha (FAP)

• FAP, auch bekannt als Seprase und SIMP, ist ein zelloberflächengebundenes Glykoprotein-Serinprotease.
• Seine Endopeptidase- und Dipeptidyl-Peptidase-Aktivitäten richten sich gegen Substrate wie Alpha-2-Antiplasmin, SPRY2 und Neuropeptide (NPY, PYY, Substanz P), mit einer Präferenz für Ala/Ser-Gly-Pro-Ser/Asn/Ala-Konsensussequenzen.
  Verwandte Referenzen: PMID:14751930, PMID:16223769, PMID:16410248, PMID:10347120, PMID:10593948, PMID:16175601, PMID:21314817
• FAP baut Gelatine und hitzedenaturiertes Kollagen Typ I ab und erleichtert so Zelladhäsion, -migration und -invasion während des Geweberemodellierens.
  Verwandte Referenzen: PMID:10347120, PMID:10455171, PMID:12376466
• In Tumoren fördert FAP die Gliom-Invasion durch den Abbau von Brevican und verstärkt Angiogenese, Kollagenabbau und Immunescape, was die maligne Progression unterstützt.
• Subzellulär findet sich FAP auf der Zellmembran, in Lamellipodien, Invadopodien und Membranausstülpungen; es kann auch sezerniert oder im Zytoplasma vorhanden sein.
• Die Gewebeexpression ist auf aktivierte Fibroblasten (z. B. Wundheilung, Krebsstroma, zirrhotische Leber), Gliomzellen und Fettgewebe beschränkt, fehlt jedoch in normaler Leber.
• Das FAP-Gen produziert durch alternatives Spleißen mindestens zwei Isoformen, die beide in Melanomen, Karzinomen und Fibroblasten-Zelllinien exprimiert werden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von FAP ~88 kDa; verwenden Sie geeignete Gelprozente (z. B. 8–10% SDS-PAGE) und bestätigen Sie die Bandspezifität mit relevanten Kontrollen.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC sind Permeabilisierungsschritte essenziell, um membrangebundenes FAP nachzuweisen; validieren Sie die Färbung in positiven Zelllinien wie aktivierten Fibroblasten oder Krebszellen.
• Für ELISA-Anwendungen kann dieser polyklonale Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz dienen; eine Optimierung der Paarung und geeignete Blockierung werden empfohlen.
• Angesichts der polyklonalen Natur und des nahezu vollständigen Immunogens erkennt der Antikörper wahrscheinlich mehrere Epitope, was für den Nachweis von Varianten bei Mensch, Maus und Ratte von Vorteil sein kann.
• Überprüfen Sie die Kreuzreaktivität mit Maus- und Rattenproben unter Verwendung speziesspezifischer Positivkontrollen, da die Expressionsniveaus variieren können.
• Bedenken Sie, dass lösliches FAP in einigen biologischen Flüssigkeiten vorhanden ist, was mit membrangebundenen Formen in bestimmten Assays konkurrieren könnte.

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