Kaninchen-polyklonaler Anti-Fibrillarin/U3-RNP-Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - P22087

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Fibrillarin/U3 RNP

• Fibrillarin, kodiert durch das FBL-Gen (auch bekannt als FIB1, FLRN), ist ein hochkonserviertes nukleoläres Protein und wurde ursprünglich als nukleoläres Sklerodermie-Antigen mit einem Molekulargewicht von 34 kDa identifiziert.
• Es fungiert als S-Adenosyl-L-methionin-abhängige Methyltransferase, die eine ortsspezifische 2'-O-Methylierung von Riboseeinheiten in prä-ribosomaler RNA (prä-rRNA) katalysiert, geleitet durch kleine nukleoläre RNAs (snoRNAs) der Box C/D (nach Ähnlichkeit). Verwandte Referenzen: PMID:30540930
• Fibrillarin ist ein Kernbestandteil des Prozessoms der kleinen Untereinheit (SSU), des frühesten Vorläufers der kleinen ribosomalen Untereinheit, und unterstützt die Faltung, Modifikation und Spaltung der prä-rRNA. Verwandte Referenzen: PMID:34516797
• Neben der RNA-Methylierung wirkt Fibrillarin als Proteinmethyltransferase und vermittelt die Methylierung von Histon H2A an Glutamin 105 (H2AQ104me), wodurch die Bindung des FACT-Komplexes am ribosomalen DNA-Lokus beeinträchtigt wird. Verwandte Referenzen: PMID:24352239, PMID:30540930
• Es katalysiert außerdem die 2'-O-Methylierung der kleinen nukleären RNA U6 (snRNA) innerhalb von Box-C/D-RNP-Komplexen, eine für die Genauigkeit des prä-mRNA-Spleißens entscheidende Modifikation. Verwandte Referenzen: PMID:32017898
• Auf subzellulärer Ebene befindet sich Fibrillarin überwiegend im Nukleolus, kommt jedoch zusätzlich im Nukleoplasma vor, was seine Funktionen bei der Prozessierung ribosomaler RNA und beim Spleißen widerspiegelt.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen von Fibrillarin gehören Acetylierung, Phosphorylierung und Methylierung sowie die Bildung von Isopeptidbindungen und ubiquitinähnliche Konjugationen, die seine Aktivität und Lokalisation regulieren können.
• Das Protein hat ein Molekulargewicht von 33784 Da und wird umfassend als Marker für die Struktur und Funktion des Nukleolus untersucht.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 100-321) umfasst eine zentrale Region von Fibrillarin, die über verschiedene Spezies hinweg hochkonserviert ist; eine Kreuzreaktivität mit Maus, Ratte und Affe wird erwartet.
• Im Western Blot sollte eine Hauptbande bei ungefähr 34 kDa sichtbar sein, die dem Volllängenprotein entspricht; zusätzliche Banden können aufgrund posttranslationaler Modifikationen oder Isoformen auftreten.
• Bei der Immunfluoreszenz lokalisiert sich Fibrillarin im Nukleolus und im Nukleoplasma; eine Ko-Färbung mit nukleolären Markern wie Nukleolin kann die Spezifität bestätigen.
• Für die Immunpräzipitation sollten Antikörperkonzentration und Inkubationsbedingungen optimiert werden; die Verwendung von Kernextrakten zur Anreicherung des Zielproteins sollte in Betracht gezogen werden.
• Führen Sie geeignete Kontrollen (z. B. Blockierungspeptid, Knockout-Lysate) durch, um die Spezifität des Antikörpers in Ihrem Assaysystem zu bestätigen.

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