Anti-FH (Fumarathydratase) Polyklonale Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P07954

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Fumarathydratase

• FH katalysiert die reversible stereospezifische Umwandlung von Fumarat zu L-Malat, eine Reaktion, die für die mitochondriale Energieproduktion und zytosolische Stoffwechselwege von zentraler Bedeutung ist. Verwandte Referenzen: PMID:30761759
• Im mitochondrialen Tricarbonsäure-(TCA)-Zyklus hydratisiert FH Fumarat zu L-Malat und trägt so zur NADH-Generierung bei. Im Zytosol dehydratisiert es L-Malat zu Fumarat und unterstützt den Harnstoffzyklus und den Argininkatabolismus.
• Alternative Translationsinitiierung erzeugt mitochondriale und zytosolische Isoformen, die nach Erkenntnissen aus anderen Spezies wahrscheinlich entgegengesetzte katalytische Präferenzen aufweisen.
• FH ist an der Reparatur von DNA-Doppelstrangbrüchen beteiligt, indem es nach DNA-Schäden in den Zellkern transloziert und die nicht-homologe Endverbindung (NHEJ) fördert. Es katalysiert die Bildung von Fumarat, das die Histondemethylase KDM2B hemmt, was zu erhöhtem H3K36me2 führt und die Assemblierung von Reparaturproteinen erleichtert. Verwandte Referenzen: PMID:20231875 PMID:26237645
• Die subzelluläre Lokalisierung erstreckt sich über Mitochondrien, Zytoplasma, Zellkern und Chromosom; die nukleäre Akkumulation wird durch genotoxischen Stress und Phosphorylierung durch PRKDC induziert.
• FH wirkt als Tumorsuppressor; Keimbahnmutationen sind mit hereditärer Leiomyomatose und Nierenzellkrebs (HLRCC) sowie Fumarathydratase-Mangel verbunden.
• Posttranslationelle Modifikationen einschließlich Acetylierung und Phosphorylierung regulieren die FH-Aktivität und den intrazellulären Transport.
• FH wird in roten Blutkörperchen exprimiert; bei Patienten mit hereditärer nicht-sphärozytärer hämolytischer Anämie wurden reduzierte zytoplasmatische Spiegel beobachtet.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 45–510 des menschlichen FH ab und umfasst den Großteil der Proteinsequenz. Dieses Design erkennt wahrscheinlich sowohl mitochondriale als auch zytosolische Isoformen.
• Für die Western-Blot-Analyse beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 55 kDa. Aufgrund von Isoformunterschieden oder posttranslationalen Modifikationen können mehrere Banden auftreten; validieren Sie die Spezifität mit geeigneten Kontrollen.
• Für Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) optimieren Sie Antigen-Retrieval- und Fixierungsprotokolle. Es werden positive und negative Gewebekontrollen mit bekannten FH-Spiegeln empfohlen.
• Bei ELISA-Anwendungen erwägen Sie die Verwendung von rekombinantem FH-Protein als Standard für quantitative Assays und überprüfen Sie die Kreuzreaktivität mit homologen Proteinen anderer Spezies.

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