Anti-FH (Fumarat-Hydratase) Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P07954

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: FH (Fumarat-Hydratase) Funktion und Lokalisierung

• FH katalysiert die reversible Hydratisierung von Fumarat zu L-Malat im Zitronensäurezyklus, ein entscheidender Schritt der mitochondrialen Energieproduktion (PubMed:30761759). Verwandte Referenzen: PMID:30761759

• Zytosolische FH-Isoformen nehmen am Harnstoffzyklus und Arginin-Stoffwechsel teil und produzieren Fumarat als Nebenprodukt (Aufgrund von Ähnlichkeit).

• FH ist als Tumorsuppressor und Krankheitsvarianten-Protein annotiert; Mutationen sind mit hereditären Krebssyndromen wie HLRCC verbunden.

• Als Reaktion auf DNA-Schäden wird FH von PRKDC phosphoryliert und transloziert in den Zellkern, wo es die NHEJ-Reparatur fördert, indem es die Demethylase KDM2B hemmt, was zu einem erhöhten H3K36me2 an DSBs führt (PubMed:20231875, PubMed:26237645). Verwandte Referenzen: PMID:20231875, PMID:26237645

• FH lokalisiert primär in die Mitochondrien, aber auch ins Zytosol; eine nukleäre Akkumulation erfolgt nach DNA-Schäden (PubMed:26237645).

• Alternativer Initiationsmechanismus erzeugt verschiedene Isoformen, die entweder Hydratisierungs- oder Dehydratisierungsreaktionen begünstigen können (Wahrscheinlich).

• FH wird in roten Blutkörperchen exprimiert und ist bei Patienten mit hereditärer nicht-sphärozytärer hämolytischer Anämie unbekannter Ursache unterexprimiert.

• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung; die PRKDC-vermittelte Phosphorylierung an DSBs ist entscheidend für ihre DNA-Reparatur-Funktion.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 50–150 des humanen FH; erwägen Sie die Verwendung positiver Kontrollen wie HeLa- oder HEK293T-Lysate für WB.
• Für Western Blotting sollte ein spezifisches Band bei ~55 kDa beobachtet werden; verwenden Sie geeignete Ladungskontrollen und Molekulargewichtsmarker.
• Eine subzelluläre Fraktionierung kann den Nachweis mitochondrialer oder nukleärer FH-Pools verbessern.
• Für ELISA optimieren Sie die Beschichtungsantigene und Antikörpertitration, um das beste Signal-Rausch-Verhältnis zu erzielen.
• Kreuzreaktivität mit murinem und rattem FH ermöglicht multispzies-Studien; validieren Sie dies in Ihrem experimentellen System.
• Prä-Adsorption mit dem Immunisierungspeptid kann die Bandspezifität bestätigen.

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