Anti-FGFR4 monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P22455

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: FGFR4-Funktion und -Lokalisierung

• Fibroblast Growth Factor Receptor 4 (FGFR4) ist eine Tyrosin-Proteinkinase, die als Zelloberflächenrezeptor für Fibroblast-Wachstumsfaktoren (FGFs) dient. Er reguliert Zellproliferation, Differenzierung, Migration, Lipidstoffwechsel, Gallensäurebiosynthese, Glukoseaufnahme, Vitamin-D-Stoffwechsel und Phosphat-Haushalt.
• Die Ligandenbindung aktiviert nachgeschaltete Signalkaskaden, einschließlich der PLCG1- und FRS2-Wege, was zur Produktion von second messengern (DAG, IP3) und Aktivierung der RAS-MAPK- und AKT-Wege führt.
• Die FGFR4-Signalisierung wird durch Rezeptor-Internalisierung und -Abbaus herunterreguliert; die Matrixprotease MMP14 fördert die Internalisierung und den lysosomalen Abbau von FGFR4. Konstitutiv aktivierende Mutationen oder eine beeinträchtigte Inaktivierung führen zu aberranter Signalisierung.
• Der Rezeptor lokalisiert sich an der Zellmembran, in Endosomen, im endoplasmatischen Retikulum, und es existiert eine sezernierte Form. Er wird in gastrointestinalen Epithelzellen, der Bauchspeicheldrüse sowie in Magen- und Pankreaskrebszelllinien exprimiert.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, und das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Glykosylierung, Phosphorylierung und Ubiquitin-Konjugation (Ubl-Konjugation).
• Schlüsselwörter: ATP-Bindung, Kinase, Transmembranhelix, Immunglobulin-Domäne, Disulfidbrücke, Glykoprotein, Phosphoprotein und Rezeptor.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da das Immunogen ein synthetisches Peptid ist, das der C-terminalen Region (Aminosäuren 700–802) entspricht, erkennt der Antikörper wahrscheinlich das全长-FGFR4 sowie Isoformen, die dieses Epitop enthalten. Führen Sie einen Sequenzabgleich durch, um die Epitopkonservierung über Spezies hinweg zu überprüfen.
• Für den Western Blot wird eine Bande bei ca. 88 kDa für FGFR4 in menschlichen, murinen und rattigen Proben erwartet. Verwenden Sie einen geeigneten Gel-Prozentsatz (z. B. 8–10 % SDS-PAGE) für eine optimale Auflösung. Erwägen Sie, mit einem Verdünnungsbereich des Primärantikörpers von 1:1.000–1:5.000 zu beginnen und dies in Ihrem experimentellen System zu validieren.
• Für ELISA titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Beschichtungskonzentration und Detektionsbedingungen zu bestimmen. Stellen Sie sicher, dass das rekombinante FGFR4-Protein oder das Peptidantigen mit der Immunogenregion übereinstimmt, um falsch-negative Ergebnisse zu vermeiden.

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