Polyklonaler Anti-FEN-1-Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA – P39748

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von FEN-1

• FEN-1 (Flap-Endonuklease 1), auch als DNase IV, MF1 oder RAD2 bekannt, ist eine strukturspezifische Nuklease mit 5'-Flap-Endonuklease- und 5'-3'-Exonuklease-Aktivität.
• Spielt eine entscheidende Rolle bei der DNA-Replikation, indem es während der Verarbeitung von Okazaki-Fragmenten entstehende 5'-überhängende Flap-Strukturen spaltet und einen für die Ligation geeigneten Einzelstrangbruch hinterlässt.
• Beteiligt sich am Long-Patch-Basenexzisionsreparaturweg (LP-BER), indem es innerhalb von an AP-Stellen endenden Flaps spaltet.
• Wirkt als Faktor zur Genomstabilisierung, indem es verhindert, dass Flaps in Strukturen übergehen, die Duplikationen und Deletionen verursachen könnten.
• Zeigt außerdem 5'-3'-Exonuklease-Aktivität an gespaltenen oder Lücken aufweisenden doppelsträngigen DNA-Molekülen und besitzt RNase-H-Aktivität.
• Ist an der Replikation und Reparatur ribosomaler DNA (rDNA) und mitochondrialer DNA beteiligt.
• Die subzelluläre Lokalisation ist überwiegend nukleär, einschließlich Nukleolus und Nukleoplasma; eine mitochondriale Lokalisation wurde jedoch ebenfalls berichtet.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Acetylierung, Methylierung und Phosphorylierung, die möglicherweise seine Funktion und Interaktionen regulieren.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 50–380 des humanen FEN-1 und deckt damit den Großteil des Proteins ab, was zur Erkennung mehrerer Epitope beitragen kann.
• Beim Western Blot (WB) ist eine Bande bei etwa 43 kDa zu erwarten; verwenden Sie vorzugsweise Gesamtzelllysate aus humanen oder murinen Zelllinien.
• Bei Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) wird eine nukleäre Färbung erwartet, wobei auch eine mitochondriale Lokalisation beobachtet werden kann; optimieren Sie die Bedingungen für Fixierung und Permeabilisierung.
• Bei Immunpräzipitation (IP) und ELISA kann die polyklonale Beschaffenheit die Effizienz der Bindung erhöhen; validieren Sie den Test mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus wurde bestätigt; für andere Arten sollten Sie vor der Anwendung eine Sequenzalignment-Analyse und experimentelle Validierung durchführen.
• Für langfristige Stabilität bei -20 °C lagern; wiederholte Einfrier- und Auftauzyklen vermeiden.

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