Anti-FDX1/ADX-Polyklonaler Antikörper für WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P46656

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Adrenodoxin (Ferredoxin-1)

• Adrenodoxin, auch bekannt als Ferredoxin-1, ist ein kleines Eisen-Schwefel-Protein, das in Säugetieren durch das FDX1-Gen kodiert wird.
• Es fungiert als mobiler Elektronenträger in der mitochondrialen Matrix und überträgt Elektronen von der Adrenodoxin-Reduktase auf mitochondriale Cytochrom-P450-Enzyme.
• Eine Schlüsselrolle spielt es bei der Steroidogenese: Es überträgt Elektronen an CYP11A1, das den ersten und geschwindigkeitsbestimmenden Schritt der Steroidhormon-Biosynthese katalysiert (Spaltung der Cholesterin-Seitenkette).
• Das Protein enthält einen [2Fe-2S]-Cluster, der für seine Elektronentransferaktivität essentiell ist; es bildet keinen ternären Komplex, sondern pendelt zwischen Reduktase und P450.
• Die subzelluläre Lokalisierung ist strikt auf die mitochondriale Matrix beschränkt, wo es am Stoffwechsel von Steroiden und Lipiden beteiligt ist.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, und das Protein wird als Vorläufer mit einem Transit-Peptid synthetisiert, das beim mitochondrialen Import abgespalten wird.
• Über den Elektronentransport hinaus ist es an der allgemeinen Biogenese von Eisen-Schwefel-Clustern in Mitochondrien und an der zellulären Redox-Homöostase beteiligt.
• Das FDX1-Gen ist über Arten hinweg hochkonserviert, und sein Produkt wird vorwiegend in steroidogenen Geweben wie der Nebennierenrinde und den Gonaden exprimiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus der zentralen Region von Maus-FDX1, das eine hohe Homologie mit dem menschlichen und dem Ratten-Protein aufweist, was die Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für den Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ca. 20 kDa; erwägen Sie die Verwendung eines 12–15%igen SDS-PAGE-Gels für eine optimale Auflösung.
• Bei der Immunpräzipitation (IP) und der Immunfluoreszenz (IF/ICC) stellen Sie sicher, dass die mitochondriale Integrität während der Probenvorbereitung erhalten bleibt; eine kurze Fixierung kann die Antigenzugänglichkeit verbessern.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) können Antigen-Retrieval-Methoden wie die hitzeinduzierte Epitop-Retrieval in Citratpuffer (pH 6,0) den Nachweis verbessern.
• Der Antikörper kann in ELISA verwendet werden; Titrieren Sie das Beschichtungsantigen und die Antikörperkonzentration, um einen linearen Detektionsbereich zu erzielen.
• Validieren Sie den Antikörper in der relevanten Spezies und im entsprechenden Gewebetyp, insbesondere in steroidogenen Geweben wie Nebenniere, Hoden oder Eierstock.

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