Anti-FBXL5 Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q9UKA1

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: FBXL5-Funktion und -Lokalisierung

• FBXL5 (F-box/LRR-repeat protein 5) ist eine Komponente des SCF (SKP1-cullin-F-box) E3-Ubiquitin-Protein-Ligase-Komplexes. Es reguliert die Eisenhomöostase, indem es IREB2/IRP2 für Ubiquitinierung und Abbau markiert. Verwandte Referenzen: PMID:19762596, PMID:19762597
• Die N-terminale hämerythrin-ähnliche (Hr)-Domäne enthält ein Di-Eisen-Metallzentrum, das als Eisensensor fungiert. Bei niedrigem Eisen ist FBXL5 instabil; Eisenbindung stabilisiert das Protein. Verwandte Referenzen: PMID:19762596, PMID:19762597
• Die C-terminale Domäne enthält einen redoxempfindlichen [2Fe-2S]-Cluster, der bei Oxidation FBXL5 ermöglicht, IRP2 in einem sauerstoffabhängigen Mechanismus für den Abbau zu rekrutieren. Verwandte Referenzen: PMID:32126207
• FBXL5 ubiquitiniert auch die Dynactin-Komplexkomponente DCTN1 und fördert deren Abbau. Verwandte Referenzen: PMID:17532294
• Im Zellkern ubiquitiniert FBXL5 den Transkriptionsfaktor SNAI1, verhindert dessen DNA-Bindung und fördert den Abbau. Verwandte Referenzen: PMID:24157836
• FBXL5 reguliert die DNA-Schadensantwort negativ, indem es den Abbau des DNA-Reparaturproteins NABP2 vermittelt. Verwandte Referenzen: PMID:25249620
• Es lokalisiert hauptsächlich im Zytoplasma und der perinukleären Region, wandert aber auch in den Zellkern. Seine Domänen umfassen Leucin-reiche Wiederholungen und Eisen-Schwefel-Cluster.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, wie durch Proteomik-Identifizierung und Referenzproteomdaten angezeigt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 1–310 ab, was den N-terminalen hämerythrin-ähnlichen und F-box-Domänen entspricht, die im Verlauf der Evolution bei Mensch, Maus und Ratte konserviert sind. Dieser Bereich ist wahrscheinlich für die beobachtete Kreuzreaktivität verantwortlich.
• Für Western Blotting (WB) sollten Sie das theoretische Molekulargewicht von ca. 79 kDa (UniProt) oder den vom Anbieter angegebenen 79 kDa berücksichtigen. Bestätigen Sie die Bandengröße in Ihrer spezifischen Probenmatrix und validieren Sie die Signalspezifität mit geeigneten Kontrollen (z. B. Knockdown- oder Knockout-Lysate).
• In ELISA-Anwendungen ermöglicht die polyklonale Natur möglicherweise die Detektion sowohl des nativen als auch des denaturierten Zielproteins. Optimieren Sie Beschichtungs- und Detektionsbedingungen empirisch.
• Beachten Sie, dass FBXL5 alternatives Spleißen durchläuft; daher können im WB mehrere Bänder detektiert werden. Validieren Sie das Reaktivitätsprofil des Antikörpers im entsprechenden Gewebe oder der entsprechenden Zelllinie.
• Wie bei jedem polyklonalen Antikörper sollte die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz überprüft werden, und wir empfehlen Pre-Adsorptions-Tests, wenn für Ihren Assay eine hohe Spezifität erforderlich ist.

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