Monoklonaler Anti-FAT10/UBD-Antikörper für WB und ELISA – O15205

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von FAT10/UBD

• FAT10/UBD (Ubiquitin D), auch als Diubiquitin bezeichnet, ist ein ubiquitinähnliches Protein, das als kovalenter Modifikator fungiert und Substrate NUB1-abhängig für den Abbau durch das 26S-Proteasom markiert. Die Konjugation wird durch das E1-Enzym UBA6 vermittelt. Verwandte Referenzen: PMID:15831455 PMID:16707496 PMID:19166848 PMID:17889673 PMID:35970836
• Es reguliert die NF-κB-Signalübertragung positiv, indem es den TNF-induzierten proteasomalen Abbau von ubiquitiniertem IκBα fördert. Verwandte Referenzen: PMID:19959714
• FAT10 trägt zur Chromosomeninstabilität bei, indem es die Mitose verkürzt und während der Prometaphase die Lokalisierung von MAD2L1 am Kinetochor beeinträchtigt. Verwandte Referenzen: PMID:16495226
• Es fördert die Caspase-abhängige Apoptose, insbesondere in renalen Epithelzellen, und steht im Zusammenhang mit der polyzystischen Nierenerkrankung und der HIV-assoziierten Nephropathie. Verwandte Referenzen: PMID:16495380
• FAT10 ist an der Reifung dendritischer Zellen beteiligt und unterstützt den Übergang unreifer DCs zu vollständig kompetenten antigenpräsentierenden Zellen. Verwandte Referenzen: PMID:19028597
• Unter proteotoxischem Stress kann FAT10 die Bildung von Aggresomen fördern, wenn die Kapazität des Proteasoms überschritten ist. Verwandte Referenzen: PMID:19033385
• Es reguliert die Expression der Immunoproteasom-Untereinheit PSMB9/LMP2 hoch.
• Auf subzellulärer Ebene ist FAT10 sowohl im Zellkern als auch im Zytoplasma lokalisiert.
• Es wird konstitutiv in reifen dendritischen Zellen und B-Zellen exprimiert, wobei die höchsten Konzentrationen in lymphatischen Geweben, im Gastrointestinaltrakt, in Niere, Lunge und Prostata vorkommen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid hergestellt, das die Aminosäuren 70–150 des humanen FAT10/UBD umfasst. Ziehen Sie dieses regionsspezifische Design in Betracht, um Kreuzreaktivität mit anderen ubiquitinähnlichen Proteinen zu minimieren.
• Für den Western Blot sollten Ganzzelllysate aus Zelllinien getestet werden, von denen bekannt ist, dass sie FAT10 exprimieren, beispielsweise humane B-Zell- oder dendritische Zelllinien, oder nach TNF-/LPS-Stimulation zur Induktion der endogenen Expression. Aufgrund der bestätigten Kreuzreaktivität können auch Mauszelllinien verwendet werden.
• Im ELISA kann der Antikörper als Fang- oder Detektionsreagenz zur Quantifizierung der FAT10-Konzentration eingesetzt werden. Validieren Sie die Assaybedingungen mit rekombinantem FAT10-Protein oder Zellextrakten.
• Da FAT10 Konjugate bilden kann und bei höheren Molekulargewichten erscheinen kann, sollten Sie erwägen, die Proben mit Reduktionsmitteln zu behandeln und im WB auf ubiquitinierte Spezies zu achten.

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