Anti-Fas Kaninchen-Polyclonale Antikörper für WB, ELISA – P25445

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Fas

• Fas, auch bekannt als CD95, APO-1 und TNFRSF6, ist ein Mitglied der Tumornekrosefaktor-Rezeptor-Superfamilie und ein zentraler Mediator der Apoptose.
• Es wirkt als Rezeptor für FASLG (Fas-Ligand), bildet über die Rekrutierung von FADD den todesinduzierenden Signalkomplex (DISC), der Caspase-8 und die nachgeschaltete Caspase-Kaskade aktiviert, um die Apoptose auszuführen.
• Die volllängige Isoform 1 (membrangebunden) löst Apoptose aus, während sezernierte Isoformen 2–6, die durch alternatives Spleißen entstehen, als Köderrezeptoren wirken, die FASLG-vermittelte Apoptose in vitro blockieren.
• Fas ist hauptsächlich an der Zellmembran lokalisiert, einschließlich Membran-Rafts, aber sezernierte Isoformen werden auch extrazellulär nachgewiesen.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen sind Glykosylierung, Palmitoylierung und Phosphorylierung, die den Membrantransport und die Signalübertragung regulieren.
• In ruhenden mononukleären Zellen des peripheren Blutes (PBMCs) werden Isoform 1 und Isoform 6 in gleicher Höhe exprimiert; nach Aktivierung steigt Isoform 1 an, während Isoform 6 abnimmt, was auf einen regulatorischen Schalter hindeutet.
• Fas-vermittelte Apoptose ist essenziell für die periphere Toleranz und den aktivationsinduzierten Zelltod reifer T-Zellen, was ihre Bedeutung für die Immunhomöostase unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 200–300 innerhalb der extrazellulären Domäne von humanem Fas. Diese Region ist bei Mensch, Maus und Ratte konserviert, was die Kreuzreaktivität unterstützt.
• Beim Western Blot können aufgrund von alternativem Spleißen, Glykosylierung und Membranabscheidung mehrere Banden zwischen 9–38 kDa beobachtet werden. Validieren Sie die Bandenspezifität mit geeigneten Kontrollen.
• Bei der Durchführung von ELISA verwenden Sie bitte das rekombinante Fas-Fragment als Positivkontrolle und inkubieren Sie den Antikörper vorab mit dem Immunogen, um die Spezifität zu bestätigen.
• Beachten Sie bei Studien zur Immunzellaktivierung, dass sich die Expression der Fas-Isoformen nach Stimulation ändert, daher sind Timing und Zelltyp entscheidend für den Nachweis.

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