Anti-FAP monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - Q12884

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: FAP-Funktion und Lokalisierung

• Prolylendopeptidase FAP (Fibroblasten-Aktivierungsprotein Alpha, auch bekannt als Seprase) ist ein oberflächengebundenes Glykoprotein der Serinprotease-Familie, das an dem Abbau der extrazellulären Matrix (ECM) beteiligt ist und zu Geweberemodellierung, Fibrose, Wundheilung, Entzündung und Tumorwachstum beiträgt. Es weist post-Prolin-spaltende Endopeptidaseaktivität mit einer Präferenz für Ala/Ser-Gly-Pro-Ser/Asn/Ala-Konsensussequenzen auf Substraten wie SERPINF2 und SPRY2 auf. Verwandte Referenzen: PMID:14751930 PMID:16223769 PMID:16410248

• FAP baut Gelatine und hitzedenaturiertes Kollagen Typ I ab, jedoch nicht natives Kollagen Typ I und IV, Vitronectin, Tenascin, Laminin, Fibronektin, Fibrin oder Kasein. Verwandte Referenzen: PMID:10347120 PMID:10455171 PMID:12376466

• Das Enzym besitzt zudem Dipeptidylpeptidaseaktivität und spaltet N-terminale Dipeptide, bei denen der vorletzte Rest Prolin ist, mit einer Präferenz für Ala-Pro, Ile-Pro, Gly-Pro, Arg-Pro und Pro-Pro. Verwandte Referenzen: PMID:10347120 PMID:10593948 PMID:16175601

• Natürliche Substrate für die Dipeptidylpeptidaseaktivität sind Neuropeptid Y, Peptid YY, Substanz P und das natriuretische Hirnpeptid 32. Verwandte Referenzen: PMID:21314817

• Die Plasmamembran-Form von FAP fördert in Assoziation mit DPP4, PLAUR oder Integrinen die perizelluläre Proteolyse, Zelladhäsion, Migration und Invasion und verbessert dadurch Tumorprogression, Angiogenese und Immunevasion.

• FAP lokalisiert sich an der Zelloberfläche, Membran, Lamellipodien, Invadopodien und Membranruffeln; es wird außerdem sezerniert und ist im Zytoplasma nachweisbar. Es wird stark exprimiert in aktivierten Fibroblasten von heilenden Wunden, Tumorstroma, zirrhotischer Leber und Fettgewebe, mit isoformspezifischer Expression in Melanom-, Karzinom- und Fibroblast-Zelllinien.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für die Durchflusszytometrie titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Färbekonzentration für Ihre spezifische Zellart und experimentellen Bedingungen zu bestimmen.
• Das Immunogen umfasst die extrazelluläre Domäne (Aa 26-760), sodass der Antikörper sowohl membrangebundenes als auch lösliches FAP nachweisen kann; validieren Sie die Nachweisspezifität in Ihrem Assaysystem.
• Verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen und fixieren/permeabilisieren Sie Zellen, wenn intrazelluläre Färbung erforderlich ist.
• Validieren Sie die Antikörperleistung in relevanten humanen Proben (z. B. aktivierte Fibroblasten, Tumorzelllinien), da die Kreuzreaktivität auf Menschen beschränkt ist.

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