Anti-FAK Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q05397

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: FAK-Funktion und -Lokalisierung

• Proteinidentität: FAK (Fokale Adhäsionskinase 1), auch bekannt als PTK2, ist eine nicht-rezeptorgebundene Proteintyrosinkinase, die als kritischer Regulator der Zelladhäsion, -migration und -zytoskelettumorganisation dient. Sie existiert in mehreren Isoformen, einschließlich der全长-FAK und einer hemmenden Isoform FRNK (FAK-related non-kinase), der die Kinasedomäne fehlt.
• Kernfunktionen: FAK leitet Signale von Integrinen und Wachstumsfaktorrezeptoren weiter und koordiniert die Dynamik der fokalen Adhäsionen, die Zellausbreitung und die Motilität. Es bildet Signalkomplexe mit SRC-Familienkinasen, was zur Phosphorylierung nachgeschalteter Effektoren wie Paxillin und CAS-Familienmitgliedern führt (PubMed:9360983).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:9360983
• Genfamilie: Codiert durch das PTK2-Gen, gehört FAK zur FAK-Familie der Tyrosinkinasen. Es ist ubiquitär exprimiert und spielt eine prominente Rolle bei der embryonalen Entwicklung, der Angiogenese und der Bildung des Nervensystems.
• Subzelluläre Lokalisierung: FAK lokalisiert sich primär an fokalen Adhäsionen der Zellmembran und findet sich auch im Zytoplasma, Kern, Zentrosom und der Basalkörper der Geißel (Cilium). Der Transport zwischen Adhäsionsstellen und dem Kern ermöglicht die Integration mechanischer und Wachstumssignale.
• Posttranslationale Modifikationen und Schlüsselwörter: FAK unterliegt einer Autophosphorylierung bei Y397, wodurch eine Docking-Stelle für SRC geschaffen wird. Zusätzliche Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung regulieren seine Aktivität und Stabilität. Zu den Schlüsselwörtern gehören ATP-Bindung, Zellverbindung, Kinase, Phosphoprotein und Entwicklungsprotein.
• Gewebsspezifität: FAK ist in verschiedenen Geweben ubiquitär exprimiert und wird in B- und T-Lymphozyten, Lungenfibroblasten und Epithelzellen nachgewiesen (PubMed:31630787). Seine Expression ist für die normale kardiale und neuronale Entwicklung unerlässlich.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:31630787

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 734–834) entspricht der C-terminalen fokalen Adhäsions-Targeting-(FAT)-Domäne, die sowohl in der全长-FAK als auch in der FRNK-Isoform vorhanden ist. Daher kann der Antikörper beide Formen erkennen – validieren Sie dies in Ihrem Zell-/Gewebemodell mit geeigneten Molekulargewichtsmarkern (全长 ~119 kDa, FRNK ~41 kDa).
• Für das Western Blotting sorgen Sie für eine ausreichende Proteinbeladung und optimieren die Verdünnung des Primärantikörpers; eine Bande bei 119 kDa wird für die全长-FAK in den meisten menschlichen, murinen und Rattenproben erwartet.
• Bei der Immunhistochemie und Immunfluoreszenz konzentriert sich FAK typischerweise an fokalen Adhäsionen in der Nähe des Zellrandes, kann aber je nach Zelltyp und Aktivierungszustand auch eine zytoplasmische oder perinukleäre Färbung zeigen. Verwenden Sie geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsmethoden.
• Für die Immunpräzipitation kann die polyklonale Natur eine robuste Erfassung bieten; bestätigen Sie dies mit positiven Kontrolllysaten.

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