Anti-Faktor IX / F9 polyklonaler Antikörper für WB, IF-P, ELISA - P00740

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Faktor IX / F9

• Gerinnungsfaktor IX (Christmas-Faktor, Plasmathromboplastinkomponente) ist ein Vitamin-K-abhängiges Serinprotease, das eine kritische Rolle im intrinsischen Weg der Blutgerinnung spielt, indem es Faktor X in seine aktive Form (Faktor Xa) umwandelt in Anwesenheit von Ca²⁺-Ionen, Phospholipiden und Faktor VIIIa (PubMed:8295821, PubMed:2592373, PubMed:20121197).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:8295821
  PMID:2592373
  PMID:20121197
• Faktor IX wird hauptsächlich in der Leber synthetisiert und in das Blutplasma sezerniert, wo er als inaktives Zymogen zirkuliert (PubMed:19846852, PubMed:2592373, PubMed:3857619, PubMed:8295821, PubMed:9169594).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:19846852
  PMID:2592373
  PMID:3857619
  PMID:8295821
  PMID:9169594
• Das Protein unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich der Gamma-Carboxylierung von Glutaminsäureresten, Phosphorylierung, Sulfatierung und Hydroxylierung, die für seine kalziumabhängige Membranbindung und biologische Aktivität wesentlich sind.
• Alternatives Spleißen erzeugt multiple Isoformen von Faktor IX, was zur regulatorischen Vielfalt in der Gerinnung beiträgt.
• Mutationen im F9-Gen verursachen Hämophilie B (Christmas-Krankheit), eine rezessive, X-chromosomale Blutungsstörung, die durch einen Mangel an Faktor IX-Aktivität gekennzeichnet ist.
• Das Protein besteht aus einer N-terminalen Gla-Domäne, zwei EGF-ähnlichen Wiederholungen und einer C-terminalen Serinprotease-Domäne, die für die Kalziumbindung, Protein-Protein-Wechselwirkungen und die katalytische Aktivität wesentlich sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Die Immunogensequenz (Aminosäuren 29–192 von humanem Faktor IX) umfasst die Gla-Domäne und die EGF-ähnlichen Wiederholungen; daher kann der resultierende Antikörper sowohl das Zymogen als auch die aktivierten Formen erkennen.
• Beim Western Blotting wird ein Band bei ca. 52 kDa erwartet, aber aufgrund posttranslationaler Modifikationen und potenzieller proteolytischer Verarbeitung kann das scheinbare Molekulargewicht abweichen. Validieren Sie mit geeigneten positiven Kontrollen wie humanem Plasma oder Lebergewebe-Lysaten.
• Eine positive Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde berichtet, was die Verwendung des Antikörpers in Nagetiermodellstudien ermöglicht; jedoch wird eine vorläufige Validierung in jedem experimentellen System empfohlen.
• Für ELISA und Immunfluoreszenz (IF-P) sollten Sie die Antigen-Retrieval- und Antikörperverdünnungsbedingungen basierend auf dem spezifischen Assay-Format und dem Probentyp optimieren.

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