Anti-F13A1 polyklonaler Antikörper für WB, IF-P, ELISA - P00488

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: F13A1-Funktion und Lokalisierung

• Die Gerinnungsfaktor-XIII-A-Kette ist die katalytische Untereinheit des Faktor-XIII-Fibrin-stabilisierenden Faktorkomplexes, der eine entscheidende Rolle im letzten Schritt der Blutgerinnungskaskade spielt.
• Nach Aktivierung durch Thrombin und Calciumionen wird die Faktor-XIII-A-Kette zu einer Transglutaminase, die die Bildung kovalenter Gamma-Glutamyl-Epsilon-Lysin-Quervernetzungen zwischen Fibrinmonomeren katalysiert und so den Fibrinklumpen stabilisiert.
• Zusätzlich vernetzt es Alpha-2-Plasmin-Inhibitor und Fibronectin an die Alpha-Ketten von Fibrin, erhöht die Resistenz des Klumpens gegen proteolytischen Abbau und erleichtert die Wundheilung.
• Das Protein wird als Zymogen synthetisiert und ist sowohl im Zytoplasma von Thrombozyten und Megakaryozyten vorhanden als auch in das Blutplasma sezerniert, wo es als Heterotetramer mit zwei B-Ketten zirkuliert.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst Zytoplasma und sezernierten extrazellulären Raum, was mit seiner doppelten intra- und extrazellulären Rolle in der Hämostase übereinstimmt.
• F13A1 ist unter Schlüsselwörtern wie Blutgerinnung, Hämostase, Metallbindung und Calcium annotiert und wird als Krankheitsvariante im Zusammenhang mit hereditärem Faktor-XIII-Mangel anerkannt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Glykosylierung, die seine Stabilität und Sekretion beeinflussen können.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Protein, das der C-terminalen Region (aa 600-732) von humanem F13A1 entspricht. Diese Region liegt distal zum katalytischen Kern und kann sowohl Zymogen- als auch aktivierte Formen erkennen. Validieren Sie die Reaktivität in Ihrem spezifischen Assay-Kontext.
• Für Western Blot (WB): Das erwartete Molekulargewicht von humanem F13A1 in voller Länge beträgt etwa 83 kDa. Unter reduzierenden Bedingungen ist ein Band in dieser Größe zu erwarten. Beachten Sie, dass Faktor XIII im Plasma als A2B2-Heterotetramer (~320 kDa) zirkuliert, daher können unter nicht-reduzierenden Bedingungen höhermolekulare Komplexe beobachtet werden.
• Für Immunfluoreszenz (IF-P): Da F13A1 sowohl zytoplasmatisch als auch sezerniert ist, sollten Permeabilisierungsschritte zur Detektion intrazellulärer Färbung in Betracht gezogen werden. Fixierungsbedingungen sollten optimiert werden.
• Für ELISA: Dieser polyklonale Antikörper kann entweder als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden. Die Kombination mit einem monoklonalen Antikörper kann die Spezifität des Sandwich-ELISA verbessern. Titration und Pufferoptimierung werden empfohlen.
• Es wird über Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte berichtet, aber überprüfen Sie dies in Ihren experimentellen Modellen, um eine konsistente Leistung sicherzustellen.

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