Anti-EYA3 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q99504

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: EYA3-Funktion und -Lokalisierung

• EYA3 (Eyes absent Homolog 3) ist eine Proteinphosphatase und ein transkriptioneller Coaktivator, der zur Familie der „Eyes absent“-Proteine gehört, die bekanntermaßen eine kritische Rolle bei der Organogenese und Entwicklung spielen.
• Es fungiert als Tyrosinphosphatase, die spezifisch 'Tyr-142' des Histons H2AX (H2AXY142ph) dephosphoryliert und so eine effiziente DNA-Reparatur fördert, indem die Rekrutierung von DNA-Reparaturkomplexen mit MDC1 erleichtert wird. Verwandte Referenzen: PMID:19234442 PMID:19351884
• EYA3 wirkt als transkriptioneller Coaktivator für die SIX-Familie von Homöobox-Proteinen (SIX1 und wahrscheinlich SIX2, SIX4, SIX5). In Myoblasten schaltet die Rekrutierung von EYA3 in den SIX1-DACH1-Komplex die von SIX1 vermittelte Repression der Proliferation von Vorläuferzellen in eine Aktivierung um, ein Prozess, der von der Phosphataseaktivität von EYA3 abhängig zu sein scheint.
• Das Protein lokalisiert sich sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern, was seinen dualen Rollen in der Signaltransduktion und der transkriptionellen Regulation entspricht.
• EYA3 könnte an der Augenentwicklung beteiligt sein, was mit den breiteren Entwicklungsfunktionen der „Eyes absent“-Familie übereinstimmt.
• UniProt-Schlüsselwörter heben seine Beteiligung an der Chromatinregulation, dem DNA-Schaden und der -reparatur, der Transkription und der Entwicklung hervor, zusammen mit posttranslationalen Modifikationen wie Acetylierung und Phosphorylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht dem N-terminalen Bereich (Aminosäuren 1–300) von menschlichem EYA3; ein Sequenzabgleich über Arten hinweg kann helfen, die Kreuzreaktivität mit orthologen Proteinen von Maus und Ratte vorherzusagen.
• Für den Western Blot (WB) sollten Sie das vorhergesagte Molekulargewicht von ~63 kDa berücksichtigen und den Antikörper in relevanten Lysaten von menschlichen, murinen oder rattigen Zellen validieren, um die erwartete Bandengröße zu bestätigen.
• ELISA-Anwendungen können eine Optimierung des Beschichtungsantigens und der Antikörperverdünnung erfordern; die Verwendung von rekombinantem EYA3-Protein als Positivkontrolle ist ratsam.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, sollte die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz für kritische quantitative Assays überprüft werden, und geeignete Kontrollen sollten eingefügt werden, um die Reproduzierbarkeit sicherzustellen.

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