Anti-ERp29 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P30040

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ERp29-Funktion und -Lokalisierung

• ERp29, auch bekannt als ERp28, ERp31, PDIA9 und PDI-DB, ist ein im Endoplasmatischen Retikulum (ER) ansässiges Protein, das beim Menschen durch das ERP29-Gen (C12orf8) kodiert wird.
• Es zeigt keine Disulfid-Isomerase-Aktivität, spielt aber eine kritische Rolle bei der Verarbeitung und Faltung von sekretorischen Proteinen im ER-Lumen.
• ERp29 lokalisiert sich hauptsächlich im ER-Lumen und wurde auch in Melanosomen nachgewiesen, was auf eine Beteiligung an sekretorischen und Pigmentierungswegen hindeutet.
• Das Protein ist ubiquitär exprimiert, mit höheren Spiegeln in sekretorischen Geweben, was mit seiner vorgeschlagenen Funktion bei der Proteinsekretion übereinstimmt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, und das Gen unterliegt einem alternativen Spleißen, wodurch mehrere Transkriptvarianten entstehen.
• Strukturuntersuchungen (Schlüsselwort 3D-Struktur in UniProt) haben seine Domänenorganisation aufgeklärt und zum Verständnis seiner funktionellen Wechselwirkungen beigetragen.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt ca. 29 kDa (UniProt: 28993 Da), was dem beobachteten Proteingewicht in experimentellen Einstellungen entspricht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen erstreckt sich über die Aminosäuren 33–261 und deckt das reife Protein nach Entfernung des Signalpeptids ab; es wird erwartet, dass es sowohl natives als auch denaturiertes ERp29 in Anwendungen wie WB und IF/ICC erkennt.
• Für den Western Blot (WB) wird ein Band bei ca. 29 kDa erwartet; Verwenden Sie Lysepuffer, die für ER-Lumen-Proteine optimiert sind, und fügen Sie Protease-/Phosphatase-Inhibitoren hinzu.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) kann eine Antigen-Retrieval (z. B. hitzeinduzierter Citratpuffer) die Färbung in FFPE-Geweben verbessern; Validieren Sie unter Verwendung von sekretorischen Geweben mit bekannter hoher ERp29-Expression.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) ist eine Permeabilisierung unerlässlich, um Zugang zum ER-Lumen zu erhalten; eine Co-Färbung mit ER-Markern (z. B. Calnexin) kann die Lokalisierungsspezifität bestätigen.
• ELISA-basierte Assays können unter Verwendung des rekombinanten Immunogens als Referenzstandard optimiert werden; geeignete Blockier- und Waschschritte sollten empirisch ermittelt werden.
• Die berichtete Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-ERp29 (bzw. 84 % und 83 % Sequenzidentität) unterstützt artübergreifende Studien; jedoch wird eine Validierung im entsprechenden ProbenSystem empfohlen.

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