Kaninchen-polyklonaler Anti-ERK5-Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA – Q13164

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ERK5

• ERK5 (auch als Big MAP-Kinase 1 (BMK-1) oder MAPK7 bekannt) ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase aus der MAP-Kinase-Familie, die eine entscheidende Rolle bei Zellproliferation, -differenzierung und -überleben spielt.
• ERK5 wird spezifisch durch die vorgeschaltete MAP2K5-(MEK5-)Kinase aktiviert, wodurch seine Translokation in den Zellkern ausgelöst wird, wo es Transkriptionsfaktoren wie MEF2C phosphoryliert.
• Die EGF-Stimulation aktiviert ERK5 über einen Ras-unabhängigen, MAP2K5-abhängigen Signalweg, der sich von der klassischen ERK1/2-Signalkaskade unterscheidet.
• In Kardiomyozyten wirkt ERK5 als negativer Regulator der Apoptose, indem es mit STUB1/CHIP interagiert und dadurch die Ubiquitinierung und den Abbau der proapoptotischen ICER-Isoformen von CREM fördert.
• ERK5 trägt zur Endothelfunktion und zur Integrität der Blutgefäße bei und könnte an der Differenzierung von Muskelzellen beteiligt sein.
• ERK5 phosphoryliert SGK1 an Ser-78, eine für die durch Wachstumsfaktoren induzierte Progression des Zellzyklus erforderliche Modifikation.
• Auf subzellulärer Ebene ist ERK5 im Zytoplasma und im Zellkern zu finden und konzentriert sich bei Aktivierung in den nukleären PML-Körperchen.
• ERK5 wird in vielen adulten Geweben exprimiert, mit der höchsten Abundanz in Herz, Plazenta, Lunge, Niere und Skelettmuskel, ist jedoch in der Leber nicht nachweisbar.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (AS 1–310) des humanen ERK5 und kann daher sowohl Volllängen- als auch möglicherweise N-terminal verkürzte Isoformen nachweisen. Eine Validierung im relevanten Probensystem wird empfohlen.
• Beim Western-Blot ist eine Bande nahe dem vorhergesagten Molekulargewicht von 88 kDa zu erwarten. Die Verwendung geeigneter Positivkontrolllysate sollte in Betracht gezogen werden, beispielsweise aus HeLa- oder HEK293-Zellen oder aus Gewebeproben mit hoher ERK5-Expression wie Herz- oder Skelettmuskelgewebe.
• Bei Immunhistochemie (IHC-P) und Immunzytochemie (IF/ICC) kann eine Optimierung der Antigen-Retrieval- und Permeabilisierungsschritte erforderlich sein, um Zugang zu den nukleären ERK5-Pools zu erhalten. Verwenden Sie positive und negative Kontrollgewebe bzw. -zellen, um die Spezifität der Färbung zu bestätigen.
• Bei ELISA sollte, unabhängig davon, ob der Antikörper als Capture- oder Detektionsantikörper eingesetzt wird, die Kreuzreaktivität mit anderen MAP-Kinasen untersucht werden. Zur Bestätigung der Spezifität wird eine Testung gegen rekombinantes ERK1, ERK2 oder JNK empfohlen.
• Aufgrund der berichteten Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte eignet sich dieser Antikörper für translationsbezogene Studien über diese Spezies hinweg. Es wird jedoch empfohlen, eine Sequenz-Alignment-Analyse der Immunogenregion durchzuführen, um die Konservierung des Epitops zu bestätigen.

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