Anti-ERK1 (MAPK3) monoklonaler Antikörper für WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P27361

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ERK1-Funktion und Lokalisierung

• ERK1, kodiert durch das MAPK3-Gen, ist eine Serin/Threonin-Kinase, die als Kernkomponente des MAP-Kinase-Signaltransduktionswegs fungiert und diverse biologische Prozesse wie Zellwachstum, Adhäsion, Überleben und Differenzierung vermittelt (PubMed:34497368). Verwandte Referenzen: PMID:34497368
• Zusammen mit ERK2 (MAPK1) bildet es einen zentralen Knotenpunkt in der MAPK/ERK-Kaskade, die durch eine Vielzahl extrazellulärer Stimuli aktiviert wird und zur Phosphorylierung zahlreicher nachgeschalteter Ziele führt, einschließlich Transkriptionsfaktoren, Proteinkinasen und zytoskelettaler Proteine.
• ERK1 phosphoryliert über 160 Substrate, wie Transkriptionsfaktoren (z.B. ATF2, BCL6, ELK1, FOS), Zytoskelettelemente (z.B. CANX, MAP2, MAPT), Regulatoren der Apoptose (z.B. BAD, CASP9) und Regulatoren der Translation (z.B. EIF4EBP1), und reguliert so die Genexpression, den Zellzyklusfortschritt und den Stoffwechsel (PubMed:35216969). Verwandte Referenzen: PMID:35216969
• Das Protein lokalisiert in mehreren subzellulären Kompartimenten, einschließlich Zytoplasma, Zellkern, Membran-Caveolae, Zellverbindungen und Fokaladhäsionen, was kontextabhängige Signalgebung ermöglicht. Nach Aktivierung transloziert es in den Zellkern, um nukleäre Ziele zu phosphorylieren, während seine zytosolischen und membrangebundenen Pools Prozesse wie Translation, Mitose und Zelladhäsion regulieren.
• Alternatives Spleißen von MAPK3 erzeugt Isoformen, und die Kinaseaktivität wird durch Phosphorylierung an Thr-202 und Tyr-204 durch MAP2K1/MEK1 sowie durch Interaktionen mit Gerüstproteinen, Phosphatasen und subzellulärer Zielsteuerung kontrolliert.
• Über die klassische MAPK-Signalgebung hinaus ist ERK1 an endosomaler Dynamik, Lysosomenprozessierung und Fragmentierung des Golgi-Apparats während der Mitose beteiligt, was seine Rolle bei der Organellenregulation unterstreicht.
• ERK1 ist in Wirt-Virus-Interaktionen und Apoptose involviert, und seine Fehlregulation wird mit verschiedenen Krebsarten und Entwicklungsstörungen in Verbindung gebracht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das der N-terminalen Region (aa 1-100) von humanem ERK1 entspricht, was darauf hindeutet, dass der Antikörper ein Epitop innerhalb dieser Domäne erkennt. Für Western Blot wird ein Band von ungefähr 43 kDa erwartet; erwägen Sie die Verwendung einer Ladekontrolle wie GAPDH oder β-Aktin.
• Bei der Durchführung von Immunfluoreszenz (IF/ICC) oder IHC wird die Permeabilisierung von Zellen/Geweben empfohlen, um dem Antikörper Zugang zu intrazellulärem und nukleärem ERK1 zu ermöglichen. Eine Antigen-Retrieval kann für formalinfixierte, paraffineingebettete (FFPE) Proben notwendig sein.
• Für die Immunpräzipitation (IP) ist der Antikörper geeignet, natives ERK1 zu erfassen. Co-IP-Experimente können durchführbar sein, wenn das Epitop in Proteinkomplexen exponiert ist; überprüfen Sie jedoch die Co-Präzipitation bekannter Partner (z.B. MEK, RSK) in Ihrem System.
• Dieser monoklonale Antikörper ist für mehrere Anwendungen validiert, aber eine Optimierung der Verdünnung und Pufferbedingungen wird empfohlen, insbesondere bei der Verwendung von nicht-humanen oder nicht-murinen Spezies, da Kreuzreaktivität über die aufgeführten Spezies hinaus nicht getestet wurde.

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