Anti-ERCC8 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q13216

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ERCC8-Funktion und Lokalisierung

• ERCC8 (auch bekannt als CSA, CKN1, UVSS2) ist ein DNA-Exzisionsreparaturprotein und eine Substraterkennungskomponente des CSA-Komplexes.
• Der CSA-Komplex ist ein DCX (DDB1-CUL4-X-Box) E3-Ubiquitin-Protein-Ligase-Komplex, der bei der transkriptionsgekoppelten Nukleotidexzisionsreparatur (TC-NER) fungiert und RNA-Polymerase-II-blockierende Läsionen schnell vom transkribierten Strang aktiver Gene entfernt. Verwandte Referenzen: PMID:12732143 PMID:16751180 PMID:16964240
• Nach Rekrutierung zur läsionsgestoppten RNA-Polymerase II vermittelt der CSA-Komplex die Ubiquitinierung der Pol-II-Untereinheit POLR2A/RPB1 an Lys-1268, ein kritischer Schritt, der die RNA-Pol-II-Stabilität steuert und die Schadensexzision durch Rekrutierung von TFIIH einleitet. Verwandte Referenzen: PMID:12732143 PMID:16751180 PMID:16964240
• Der CSA-Komplex fördert auch die Ubiquitinierung und proteasomale Degradation von ERCC6/CSB in einer UV-abhängigen Weise, was für die Erholung der RNA-Synthese nach der Reparatur wesentlich ist. Verwandte Referenzen: PMID:16751180
• ERCC8 spielt eine Rolle bei der Reparatur von DNA-Doppelstrangbrüchen (DSB) durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ). Verwandte Referenzen: PMID:29545921
• ERCC8 lokalisiert im Zellkern, spezifisch an Chromosomen und der Kernmatrix.
• Als WD-Repeat-Protein enthält ERCC8 mehrere WD40-Domänen, und Mutationen sind mit dem Cockayne-Syndrom assoziiert, einer Störung, die sich durch Kleinwuchs, Taubheit und Photosensibilität auszeichnet.
• ERCC8 unterliegt alternativem Spleißen und ist ein Phosphoprotein, das posttranslationalen Modifikationen unterliegt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das der C-terminalen Region (aa 300-396) von humanem ERCC8 entspricht. Dieses Design kann die Spezifität für das Zielprotein erhöhen.
• Für Western Blot (WB) validieren Sie den Antikörper unter Verwendung geeigneter positiver und negativer Kontrollen. Detektieren Sie endogenes ERCC8 in Human- und Mauszelllysaten beim vorhergesagten Molekulargewicht von 44 kDa.
• Für ELISA optimieren Sie Beschichtungsantigen und Antikörperverdünnung, um eine geeignete Sensitivität zu erreichen. Kombinieren Sie ihn mit einem kompatiblen Detektionssystem.
• Bei schwachem oder keinem Signal sollten Sie das Testen verschiedener Blockierpuffer, Antikörperinkubationszeiten oder Lysataufbereitungsmethoden in Betracht ziehen. Eine hitzeinduzierte Epitopfreilegung ist für Western Blot im Allgemeinen nicht erforderlich.

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