Anti-ErbB4/HER4 monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q15303

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ErbB4/HER4 Funktion und Lokalisierung

• Rezeptor-Tyrosin-Proteinkinase erbB-4 (ErbB4/HER4) ist ein transmembranes Glykoprotein, das zur Familie der epidermalen Wachstumsfaktor-Rezeptoren (EGFR/ERBB) gehört.
• Fungiert als Zelloberflächenrezeptor für Neureguline (NRG1-4) und Mitglieder der EGF-Familie (BTC, EREG, HBEGF) und reguliert die Entwicklung von Herz, Zentralnervensystem und Brustdrüse sowie Zellproliferation, -differenzierung, -migration und Apoptose.
• Alternatives Spleißen erzeugt multiple Isoformen (JM-A, JM-B, CYT-1, CYT-2) mit unterschiedlichen Signaleigenschaften; CYT-1-Isoformen aktivieren den PI3K-AKT-Weg, während CYT-2-Isoformen diese Fähigkeit nicht besitzen.
• Proteolytische Spaltung der JM-A-Isoformen setzt lösliche intrazelluläre Domänen (4ICD) frei, die in den Zellkern translozieren können, um die Gentranskription zu regulieren (z. B. Milchproteinexpression während der Laktation) oder in die Mitochondrien, um die Apoptose zu fördern.
• Subzellulär an der Zellmembran lokalisiert, aber je nach Isoform und Verarbeitung auch im Zellkern und in den Mitochondrien zu finden.
• Höchste Expressionslevel in Gehirn, Herz, Niere, Skelettmuskel, Nebenschilddrüse, Kleinhirn, Hypophyse, Milz, Hoden und Brust.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung an mehreren Tyrosinresten, Glykosylierung und Ubiquitinierung, die die Rezeptoraktivität und den Umsatz modulieren.
• Schlüsselwörter: Kinase, Rezeptor, transmembran, Glykoprotein, Entwicklungsprotein, Apoptose, alternatives Spleißen, Krankheitsvariante (amyotrophe Lateralsklerose).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Die Immunogensequenz (aa 1200-1308) liegt innerhalb der intrazellulären Domäne, was darauf hindeutet, dass der Antikörper die全长- und die gespaltenen intrazellulären Fragmente (4ICD) von ErbB4 erkennen kann.
• Im Western Blot (WB) wird ein Hauptband nahe 147 kDa für den全长-Rezeptor erwartet; zusätzliche Bänder, die proteolytischen Fragmenten oder Isoformen entsprechen, können beobachtet werden.
• Für ELISA verwenden Sie geeignete Beschichtungsbedingungen und validieren mit rekombinantem ErbB4 oder Zelllysaten, die das Ziel exprimieren.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde berichtet; erwägen Sie eine Verifizierung in speziespezifischen Geweben oder Zelllinien.
• Bestätigen Sie die Spezifität durch Verwendung von Knockdown- oder Knockout-Kontrollen, da ErbB4 Homologie mit anderen Mitgliedern der EGFR-Familie teilt.

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