Anti-EPPIN Poliklonaler Antikörper für WB, ELISA – O95925

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von EPPIN

• EPPIN (Epididymaler Proteaseinhibitor), auch bekannt als Krebs-/Testis-Antigen 71 (CT71), gehört zur Familie der WAP-Vier-Disulfid-Kern-Domänen (WFDC7) und enthält sowohl Kunitz- als auch WAP-Domänen.
• Es wirkt als Serinprotease-Inhibitor, der für die männliche Fruchtbarkeit kritisch ist und reguliert die Hydrolyse von Semenogelin-1 (SEMG1) durch prostataspezifisches Antigen (PSA/KLK3). EPPIN bindet SEMG1, hemmt die Spermienmotilität und bietet antimikrobiellen Schutz im Ejakulatio-Gerinnsel.
• EPPIN ist lokalisiert auf der Zelloberfläche und wird sezerniert; es bedeckt die Oberfläche von testikulären und ejakulierten Spermien. Es wird von Sertoli-Zellen im Hoden und Epithelzellen im Nebenhoden exprimiert.
• Das Protein weist alternatives Spleißen auf, wodurch Isoform 2 entsteht, die spezifisch im Nebenhoden exprimiert wird.
• Wichtige strukturelle Merkmale sind mehrere Disulfidbindungen, charakteristisch für die WAP-Domäne, die zu seiner Stabilität und Funktion beitragen.
• EPPIN besitzt antimikrobielle Aktivität und schützt Spermien im Ejakulationsgerinnsel.
• Die gewebsspezifische Expression erfolgt überwiegend im Hoden und Nebenhoden, mit schwacher Expression in Myoidzellen und spermatogenen Zellen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein rekombinantes Protein entsprechend dem N-terminalen Bereich (Aa 22–133) des menschlichen EPPIN gewonnen, der die Kunitz- und WAP-Domänen umfasst. Dieser Bereich ist über Spezies hinweg konserviert, was mit der beobachteten Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte übereinstimmt.
• Für das Western Blotting wird endogenes EPPIN bei etwa 15 kDa nachgewiesen; optimieren Sie gegebenenfalls die Probenvorbereitung aus Hoden- oder Nebenhoden-Gewebslysaten.
• Für ELISA-Anwendungen validieren Sie den Antikörper in direkten oder Sandwich-Formaten mit rekombinantem EPPIN oder biologischen Flüssigkeiten wie Seminalplasma.
• Aufgrund der sezernierten Natur von EPPIN können Zellkulturüberstände von Sertoli- oder Nebenhoden-Zelllinien geeignete Nachweisquellen sein.

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