Anti-EPHA5-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – P54756

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von EPHA5

• Der Ephrin-Typ-A-Rezeptor 5 (EPHA5), auch bekannt als EHK-1, EK7 oder TYRO4, ist ein Mitglied der Ephrin-Rezeptor-Unterfamilie der Rezeptor-Tyrosinkinasen, die GPI-verankerte Ephrin-A-Liganden binden, wobei EFNA5 wahrscheinlich als sein primärer spezifischer Ligand fungiert.
• Nach der Ligandenbindung vermittelt EPHA5 eine kontaktabhängige bidirektionale Signalübertragung: die Vorwärtssignalisierung über den Rezeptor und die Rückwärtssignalisierung über den Ephrin-Liganden, wodurch wichtige Entwicklungsprozesse koordiniert werden.
• EPHA5 fungiert als Molekül für die Axonführung und ist für die Bildung der retinotektalen, entorhino-hippocampalen und hippocamposeptalen Bahnen während der Entwicklung des Nervensystems von entscheidender Bedeutung.
• Im erwachsenen Gehirn trägt EPHA5 durch die Regulierung der Synaptogenese zur synaptischen Plastizität bei, was seine Rolle über die embryonale Entwicklung hinaus unterstreicht.
• Außerhalb des Nervensystems vermittelt die Interaktion zwischen EPHA5 und EFNA5 die Kommunikation zwischen den Zellen der Langerhans-Inseln des Pankreas und reguliert die glucose-stimulierte Insulinsekretion (laut Analogie).
• Auf subzellulärer Ebene befindet sich EPHA5 in der Zellmembran und ist in Zellfortsätzen wie Axonen und Dendriten angereichert, was mit seiner Rolle bei der neuronalen Vernetzung übereinstimmt.
• Das Protein wird nahezu ausschließlich im Nervensystem exprimiert, insbesondere in kortikalen Neuronen, cerebellären Purkinje-Zellen und Pyramidenneuronen, mit einem zunehmenden Expressionsgradienten vom Vorderhirn zum Hinterhirn und Rückenmark.
• EPHA5 unterliegt alternativem Spleißen und posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Glykosylierung und Phosphorylierung – Merkmale, die für Rezeptor-Tyrosinkinasen typisch sind und die Signalaktivität modulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die N-terminalen Region (Aminosäuren 1–130) des humanen EPHA5, die das Signalpeptid und einen Teil der Ephrin-Ligandenbindungsdomäne enthält; dieses Design kann eine Spezifität für den extrazellulären Teil des Rezeptors ermöglichen.
• Für den Western-Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 115 kDa; aufgrund der Glykosylierung kann die beobachtete Bande etwas höher erscheinen. Ziehen Sie Lysate aus Gehirngewebe oder neuronalen Zelllinien (z. B. SH-SY5Y), von denen bekannt ist, dass sie EPHA5 exprimieren, als Positivkontrollen in Betracht.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) wird erwartet, dass EPHA5 an der Zellmembran und in neuronalen Fortsätzen wie Axonen und Dendriten lokalisiert ist. Validieren Sie die Färbemuster in kultivierten primären Neuronen oder neuronalen Zelllinien und verwenden Sie geeignete Kontrollen, um die Spezifität zu bestätigen.
• ELISA-Anwendungen können zum Nachweis von EPHA5 in Zelllysaten oder Gewebehomogenaten eingesetzt werden; je nach Probenmatrix wird jedoch eine Optimierung der Beschichtungs- und Nachweisbedingungen empfohlen.
• Aufgrund der Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte eignet sich dieser Antikörper für Studien an Nagetiermodellen. Bestätigen Sie jedoch die Expressionsniveaus im Zielgewebe, da EPHA5 im Nervensystem regionsspezifische Gradienten aufweist.

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