Anti-EPHA4 polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P54764

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: EPHA4-Funktion und Lokalisierung

• Ephrin-Typ-A-Rezeptor 4 (EPHA4, auch bekannt als EK8, SEK, HEK8, TYRO1) ist ein Mitglied der Eph-Rezeptorfamilie der Rezeptor-Tyrosinkinasen, kodiert durch das EPHA4-Gen.
• EPHA4 bindet an membrangebundene Ephrin-Liganden auf benachbarten Zellen und initiiert eine bidirektionale Signalübertragung (vorwärts durch den Rezeptor und rückwärts durch den Liganden). Er ist einzigartig promiskuitiv und wird sowohl durch GPI-verankerte Ephrin-A-Liganden (z. B. EFNA1) als auch durch transmembrane Ephrin-B-Liganden (z. B. EFNB3) aktiviert.
• Im sich entwickelnden Nervensystem spielt EPHA4 eine entscheidende Rolle bei der axonalen Wegfindung, einschließlich der Etablierung kortikospinaler Projektionen, und trennt motorische und sensorische Axone während der Bildung neuronaler Schaltkreise.
• Über die Entwicklung hinaus reguliert EPHA4 die synaptische Plastizität im erwachsenen Gehirn und hemmt die axonale Regeneration nach Verletzungen. Er trägt auch zur Gefäßbildung im zentralen Nervensystem bei.
• Subzellulär lokalisiert sich EPHA4 an der Zellmembran, in axonalen und dendritischen Projektionen, an postsynaptischen Dichtemembranen, in frühen Endosomen und an Adhärenzverbindungen.
• EPHA4 wird ubiquitär in verschiedenen Geweben exprimiert und ist an vielfältigen Zell-Zell-Signalereignissen beteiligt, einschließlich der Entwicklung des Thymusepithels und der Trennung der Pfeilerzellen der Cochlea. Er kann CAPRIN1 phosphorylieren, um die Bildung membranloser Kompartimente zu fördern (nach Ähnlichkeit).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die N-terminale extrazelluläre Domäne (AS 20–100), daher ist zu erwarten, dass der Antikörper den Volllängen-Rezeptor erkennt und möglicherweise lösliche Fragmente oder die abgespaltene Ektodomäne detektiert.
• Bei WB unter reduzierenden Bedingungen ist eine Bande bei ca. 110 kDa in Lysaten aus humanen, Maus- oder Ratten-Geweben/Zelllinien zu erwarten. Verwenden Sie geeignete Positiv- und Negativkontrollen zur Validierung der Spezifität.
• Für IF/ICC zeigt EPHA4 typischerweise eine Färbung der Plasmamembran und der neuronalen Projektionen. Verwenden Sie eine optimierte Fixierung (z. B. 4 % PFA) und Permeabilisierung, um die Epitopzugänglichkeit und Morphologie zu erhalten.
• Bei ELISA-Anwendungen kann die extrazelluläre Epitoperkennung für Sandwich-Assays oder Ligandenbindungs-Wettbewerbsstudien genutzt werden. Validieren Sie den Assay mit rekombinantem EPHA4-Protein, falls verfügbar.
• Da EPHA4 hoch konserviert ist, kann eine Kreuzreaktivität mit anderen Eph-Rezeptoren nicht ausgeschlossen werden; die Identität der detektierten Banden sollte nach Möglichkeit durch siRNA-Knockdown oder KO-Modelle bestätigt werden.

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