Anti-Eph-Rezeptor B3 (EPHB3) monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P54753

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des Eph-Rezeptors B3 (EPHB3)

• Der Eph-Rezeptor B3 (EPHB3), auch bekannt als EK2, ETK2, HEK2 und TYRO6, ist ein Mitglied der Ephrin-Rezeptor-Unterfamilie der Rezeptor-Tyrosinkinasen.
• EPHB3 bindet promiskuitiv an transmembrane Ephrin-B-Liganden auf benachbarten Zellen und vermittelt kontaktabhängige bidirektionale Signalgebung: Vorwärtssignalisierung über den Rezeptor und Rückwärtssignalisierung über das Ephrin.
• Es fungiert während der Entwicklung redundant mit EPHB2 bei der Axonführung und reguliert die Bildung großer interhemisphärischer Verbindungen wie des Corpus callosum und der Kommissur.
• EPHB3 trägt auch zur Entwicklung von dendritischen Dornen, zur Bildung exzitatorischer Synapsen sowie zur Zellmigration und -positionierung in Prozessen wie Angiogenese, Gaumenbildung und Entwicklung des Thymusepithels bei.
• Vorwärts- und Rückwärtssignalisierung durch den EFNB2/EPHB3-Komplex regulieren die Zelladhäsion und -migration während der Urethraltubularisierung und der Septierung der Kloake.
• Im Darmepithel hilft EPHB3, Vorläuferzellen von differenzierten Zellen innerhalb der Krypt zu trennen.
• Subzellulär lokalisiert EPHB3 an der Zellmembran und an Dendriten.
• Als Kinase enthält es charakteristische Merkmale wie eine ATP-Bindedomäne und wird durch Glykosylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung modifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 50–150 innerhalb der N-terminalen extrazellulären Region von humanem EPHB3 entspricht. Diese Region ist wahrscheinlich exponiert und könnte für den Nachweis sowohl der Volllängenform als auch der löslichen Form des Rezeptors geeignet sein, jedoch sollte die Kreuzreaktivität mit anderen Ephrin-Rezeptoren validiert werden.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 110 kDa; erwägen Sie die Optimierung der Gelkonzentration, der Transferbedingungen und der Blockierungspuffer, um dieses relativ große Protein aufzulösen.
• Im ELISA kann der Antikörper zum Nachweis von rekombinantem oder endogenem EPHB3 verwendet werden; titrieren Sie angemessen und fügen Sie relevante Kontrollen für den Hintergrund ein.
• Da der Antikörper Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte zeigt, kann er in Modellorganismen eingesetzt werden, bestätigen Sie jedoch die Reaktivität in Ihren spezifischen Gewebe- oder Zelllysaten aufgrund möglicher artspezifischer Variationen.
• Angesichts der Rolle von EPHB3 bei Entwicklung und Krebs sollten Sie Tests in Gewebeproben oder Zelllinien in Betracht ziehen, in denen eine EPHB3-Expression erwartet wird (z. B. Gehirn, Darmkrypten, bestimmte Tumorzellen).

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