Anti-EpCAM Kaninchen-Polyclonale Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – P16422

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von EpCAM

• EpCAM (Epithelialzell-Adhäsionsmolekül), auch bekannt als TACSTD1, TROP1, EGP40 und CD326, ist ein ~35 kDa großes Transmembranglykoprotein des Typs I, das als homophiles Zelladhäsionsmolekül wirkt.
• Es vermittelt kalziumunabhängige homophile Wechselwirkungen zwischen Darmepithelzellen und intraepithelialen Lymphozyten, trägt zur immunologischen Barriere an Schleimhautoberflächen bei und bildet eine erste Verteidigungslinie gegen Infektionen.
• EpCAM spielt eine Rolle bei der Proliferation und Differenzierung von embryonalen Stammzellen (ESC), seine Expression nimmt bei der ESC-Differenzierung rapide ab; es reguliert die Expression von FABP5, MYC sowie den Zyklinen A und E hoch.
• Das Protein lokalisiert an die laterale Zellmembran und ist an Tight Junctions angereichert, was mit seiner Rolle bei der Zell-Zell-Adhäsion und der Integrität der Epithelbarriere übereinstimmt.
• EpCAM wird hoch und selektiv in undifferenzierten ESCs exprimiert und findet sich auf der Oberfläche fast aller Epithelzellmembranen, fehlt aber auf mesodermalen und neuralen Zellen; es wird auch auf Adenokarzinomzellen nachgewiesen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung und Disulfidbindungsbildung; EpCAM enthält ein Signalpeptid, eine extrazelluläre Domäne mit Thyroglobulin-Repeats vom Typ 1, eine einzelne Transmembranhelix und einen kurzen zytoplasmatischen Schwanz; es wird als Tumorantigen und Krankheitsvariante bei der hereditären nichtpolypösen kolorektalen Krebs (HNPCC) erkannt.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 24–265), die in nativer Konformation wahrscheinlich zugänglich ist; dieses Design kann Anwendungen wie WB, IF/ICC und ELISA unterstützen.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 35 kDa; aufgrund von Glykosylierung und anderen Modifikationen kann die beobachtete Bande jedoch anders wandern. Validieren Sie in relevanten Lysaten von Epithelzellen aus Mensch, Maus oder Ratte.
• Bei IF/ICC konzentrieren Sie sich auf Membranfärbung mit punktförmiger Anreicherung an Junctions; eine geeignete Permeabilisierung ist entscheidend. Fügen Sie geeignete Kontrollen hinzu (z. B. undifferenzierte vs. differenzierte ESC-Linien), um die Spezifität zu bestätigen.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde berichtet, aber die Leistung in jeder Anwendung sollte unabhängig im jeweiligen spezifischen Probensystem von Interesse validiert werden.

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