Anti-EpCAM Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P16422

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: EpCAM-Funktion und -Lokalisierung

• EpCAM (Epithelial Cell Adhesion Molecule), auch bekannt als TROP1, EGP40 und CD326, ist ein transmembranes Glykoprotein, das vom EPCAM-Gen kodiert wird.
• Fungiert als homophiles Zelladhäsionsmolekül, vermittelt Wechselwirkungen zwischen intestinalen Epithelzellen und intraepithelialen Lymphozyten und trägt zur mukosalen immunologischen Barriere bei.
• Spielt eine Rolle bei der Proliferation und Differenzierung von embryonalen Stammzellen; reguliert die Expression von FABP5, MYC sowie Cyclin A und E hoch.
• Lokalisiert sich an der lateralen Zellmembran und den Tight Junctions und trägt zur Zell-Zell-Adhäsion und Integrität der Verbindungen bei.
• Wird hochgradig und selektiv auf undifferenzierten embryonalen Stammzellen exprimiert, wobei der Spiegel bei der Differenzierung schnell abnimmt.
• Wird in fast allen epithelialen Zellmembranen exprimiert, fehlt jedoch in mesodermalen und neuronalen Zellmembranen; prominent auf der Oberfläche von Adenokarzinomen zu finden.
• Impliziert bei hereditärem nicht-polypösem kolorektalem Karzinom (Lynch-Syndrom) und als Tumorantigen erkannt; enthält ein Signalpeptid und Disulfidbrücken.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen extrazellulären Domäne (Aminosäuren 1–100) von humanem EpCAM und umfasst einen Bereich, der für homophile Wechselwirkungen kritisch ist.
• Im Western Blot (WB) wird eine Bande von ca. 35 kDa erwartet; natives glykosyliertes EpCAM kann jedoch mit einem höheren Molekulargewicht wandern. Validieren Sie die Detektion in epithelialen Zelllinien (z. B. MCF-7, HepG2), die EpCAM endogen exprimieren.
• Für die Immunhistochemie-Paraffin (IHC-P) wird EpCAM stark auf der Membran von Epithelzellen exprimiert. Berücksichtigen Sie geeignete Antigen-Retrieval-Methoden und schließen Sie positive (z. B. Kolonkarzinom) und negative (z. B. mesenchymales Gewebe) Kontrollen ein.
• In ELISA-Anwendungen kann dieser monoklonale Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz zur Quantifizierung von löslichem oder zelloberflächengebundenem EpCAM getestet werden. Die Kreuzreaktivität mit murinem und rattem EpCAM kann die Analyse über Speziesgrenzen hinweg erleichtern; die Epitopkonservierung sollte jedoch verifiziert werden.

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