Anti-Epac1/RAPGEF3 Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB, IHC-P, ELISA - O95398

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Epac1/RAPGEF3-Funktion und -Lokalisierung

• Epac1 (Exchange Protein directly Activated by cAMP 1), kodiert durch das RAPGEF3-Gen, ist ein cAMP-regulierter Guanin-Nukleotid-Austauschfaktor (GEF), der spezifisch die kleinen GTPasen RAP1A und RAP2A aktiviert.
• Als zentraler Vermittler der cAMP-Signalgebung moduliert Epac1 physiologische Prozesse, einschließlich Angiogenese und der dynamischen Kontrolle der endothelialen Barrierefunktion über einen Rho-unabhängigen Weg.
• Epac1 erleichtert die Zusammenbildung eines Signalkomplexes, der PDE3B und PIK3R6 umfasst, was zur Aktivierung des PI3K-Gamma-Komplexes führt und seine Rolle in der kompartimentierten cAMP-Signalgebung weiter unterstreicht.
• Das Protein ist essentiell für die Remodellierung des Aktin-Zytoskeletts an Zell-Zell-Kontakten, einschließlich der Bildung von Stressfasern und junctionalem Aktin, und erhält so die endotheliale Integrität.
• Epac1 ist im endomembranösen System lokalisiert und weit verbreitet in Geweben exprimiert, wobei die höchsten Spiegel in der adulten Niere, dem Herzen, der Schilddrüse, dem Gehirn und der fetalen Niere beobachtet werden.
• Seine Aktivität wird streng durch direkte cAMP-Bindung an seine zyklische Nukleotid-Bindedomäne reguliert, was ihn als cAMP-bindenden Nukleotid-Austauschfaktor klassifiziert.
• Posttranslationale Phosphorylierung wurde berichtet, und alternatives Spleißen generiert mehrere Isoformen, was die funktionelle Vielfalt erweitert.
• Schlüsselwörter von UniProt umfassen: 3D-Struktur, Angiogenese, cAMP, cAMP-bindend, Guanin-Nukleotid-freisetzender Faktor, Membran, Nukleotid-bindend, Phosphoprotein, Proteomics-Identifizierung, Referenzproteom.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem C-terminalen Peptid (Aa 824-923) von humanem Epac1; bestätigen Sie, dass dieser Bereich in Ihrer Ziel-Isoform vorhanden ist, wenn alternatives Spleißen berücksichtigt wird.
• Angesichts der starken gewebsspezifischen Expression sollten Sie Lysate aus menschlicher Niere, Herz oder Gehirn als positive Kontrollen für Western Blots in Betracht ziehen.
• Validieren Sie für die Immunhistochemie den Antikörper an formalinfixierten, paraffineingebetteten (FFPE) Schnitten und wenden Sie bei Bedarf eine Antigen-Retrieval an; fügen Sie Maus- und Rattengewebe als Kreuzreaktivitätskontrollen hinzu.
• Führen Sie serielle Verdünnungen durch, um die optimalen Konzentrationen für jede Anwendung zu ermitteln; typische Startbereiche für Kaninchen-Monoklonalantikörper liegen bei 1:500–1:2000 für WB und 1:100–1:500 für IHC.
• Bei der Durchführung von Western Blots liegt die vorhergesagte Molekularmasse bei ~104 kDa; verwenden Sie geeignete Gelkonzentrationen (z. B. 8 % SDS-PAGE) und verlängerte Transferzeiten für hochmolekulare Proteine.

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