Anti-EP300 polyklonaler Antikörper für IHC-P, ELISA - Q09472

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der Histonacetyltransferase p300

• Die Histonacetyltransferase p300 (auch bekannt als E1A-assoziiertes Protein p300, KAT3B) ist ein großer transkriptioneller Koaktivator mit einer Größe von etwa 264 kDa, der vom EP300-Gen kodiert wird. Sie gehört zur Familie der p300/CBP-Acetyltransferasen, die die Chromatinstruktur und Genexpression regulieren.
• p300 fungiert als Histonacetyltransferase und acetyliert alle vier Kernhistone in Nukleosomen (H2A, H2B, H3, H4). Diese Histonacetylierung dient als epigenetisches Kennzeichen für die Transkriptionsaktivierung und kann auch duale Acetyl-Methyl-Markierungen (Kacme) an den Histonen H3 und H4 erzeugen, die mit aktivem Chromatin assoziiert sind. Zugehörige Referenzen: PMID:23415232 PMID:23934153 PMID:8945521 PMID:21131905 PMID:23911289 PMID:37731000
• Neben Histonen acetyliert p300 zahlreiche Nicht-Histon-Proteine, darunter Transkriptionsfaktoren (z. B. p53/TP53, ALX1, FOXO1, STAT3) und andere Regulatoren (z. B. HDAC1, SIRT2), wodurch deren Stabilität, DNA-Bindung oder enzymatische Aktivität moduliert wird. Außerdem ist p300 an der DNA-Schadensantwort beteiligt, indem es Histon H1 und PCNA acetyliert. Zugehörige Referenzen: PMID:11511361 PMID:15448695 PMID:15653507 PMID:12929931 PMID:18722353
• p300 weist eine vielseitige Acyltransferaseaktivität auf und nutzt verschiedene Acyl-CoA-Substrate, um Histon-Krotonylierung, -Butyrylierung, -2-Hydroxyisobutyrylierung, -Lakt ylierung, -Propionylierung und -Isonicotinylierung zu katalysieren, wodurch der Stoffwechsel mit dem Chromatinzustand verknüpft wird. Zugehörige Referenzen: PMID:17267393 PMID:25818647 PMID:29775581 PMID:31645732
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst den Zellkern, das Zytoplasma und die Chromosomen. Kernständiges p300 wird durch spezifische Transkriptionsfaktoren zu Promotoren rekrutiert und ist über Interaktionen mit CLOCK/BMAL1 an der Regulation des circadianen Rhythmus beteiligt. Zugehörige Referenzen: PMID:14645221
• p300 ist Substrat verschiedener posttranslationaler Modifikationen, darunter Acetylierung, Phosphorylierung, Methylierung, Citrullinierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität und Interaktionen feinregulieren. Seine Bromodomäne erkennt acetylierte Lysine, und das Protein enthält Zinkfingermotive.
• Bei der viralen Pathogenese wird p300 vom HIV-1-Tat-Protein zur Förderung der proviralen Transkription ausgenutzt und interagiert mit dem Adenovirus-E1A-Protein, wodurch es mit der zellulären Transformation in Verbindung steht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Protein, das sich über die Aminosäuren 940–1030 erstreckt, eine Region, die möglicherweise einen Teil der katalytischen HAT-Domäne oder andere funktionelle Bereiche umfasst. Dieses Design kann für den Nachweis von vollconversation length full-length p300 und möglicherweise zur Unterscheidung von dem hochhomologen CBP geeignet sein. Die Spezifität sollte anhand von Knockout- oder Knockdown-Modellen überprüft werden.
• Die vom Anbieter empfohlenen Anwendungen sind IHC-P und ELISA. Bei der Immunhistochemie sollten die Bedingungen für die Antigenretrieval und die Antikörperkonzentration für nukleäre und zytoplasmatische Färbemuster optimiert werden. Für ELISA sollte die Validierung mit rekombinantem p300-Protein als Standard erfolgen.
• Aufgrund seiner Größe (264 kDa) sollten bei einem gegebenenfalls durchgeführten Western Blot eine geeignete Gelelektrophorese (z. B. 6–8% SDS-PAGE) und verlängerte Transferzeiten verwendet werden.
• Laut den Daten des Anbieters zeigt der Antikörper Kreuzreaktivität mit p300 aus Maus und Ratte und kann daher in Nagetiermodellen eingesetzt werden. Die Reaktivität mit dem jeweiligen Gewebe oder der jeweiligen Zelllinie sollte jedoch bestätigt werden.

CamelBio: Ihre zentrale Beschaffungsplattform

CamelBio ist darauf spezialisiert, Diagnostikhersteller und Forschungslabore mit einem umfassenden Sortiment an IVD-Rohstoffen zu versorgen. Dieser polyklonale Anti-EP300-Antikörper unterstützt die Erforschung der Epigenetik und Transkriptionsregulation. Darüber hinaus können wir passende Antikörperpaare, rekombinante Antigene und ergänzende Reagenzien liefern, um Ihre Assay-Entwicklung zu optimieren. Ganz gleich, ob Sie Großmengen oder kundenspezifische Modifikationen benötigen – CamelBio schließt die Lücke vom Konzept bis zur Klinik durch effiziente Beschaffung und technische Expertise.