Anti-EMC4 Kaninchenmonoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q5J8M3

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von EMC4

• EMC4, auch bekannt als PIG17 oder TMEM85, ist eine Untereinheit des Endoplasmatisches Retikulum-Membrankomplexes (EMC), einer Multiprotein-Insertase, die die Biogenese von Membranproteinen unterstützt.
• Der EMC vermittelt die energieunabhängige Insertion neu synthetisierter Membranproteine in die ER-Membran, mit einer Präferenz für Substrate mit schwach hydrophoben oder destabilisierenden Transmembrandomänen. Zugehörige Referenzen: PMID:29242231, PMID:29809151, PMID:30415835
• Es ist essenziell für die kotranslationale Insertion von Multipass-Membranproteinen und gewährleistet die korrekte Integration von Stop-Transfer-Membrananker-Sequenzen in ER-Membranen. Zugehörige Referenzen: PMID:29809151, PMID:30415835
• Darüber hinaus wird EMC4 für die posttranslationale Insertion von schwenkverankerten (TA) Proteinen in die ER-Membran benötigt. Zugehörige Referenzen: PMID:29242231, PMID:29809151
• Durch die Vermittlung der korrekten kotranslationalen Insertion von N-terminalen Transmembrandomänen in einer N-exo-Topologie steuert der EMC die topologische Orientierung von Multipass-Membranproteinen wie G-Protein-gekoppelten Rezeptoren (GPCRs). Zugehörige Referenzen: PMID:30415835
• EMC4 lokalisiert an der Membran des Endoplasmatischen Retikulums. Alternatives Spleißen erzeugt Isoformen mit unterschiedlicher Gewebeexpression – Isoform 1 wird in Gehirn und Herz exprimiert, während Isoform 2 im Herz exprimiert wird.
• Das Protein unterliegt der Acetylierung und Phosphorylierung und wurde in Proteomikanalysen identifiziert; es ist mit Schlüsselwörtern wie alternatives Spleißen, Apoptose und Transmembrandomänen annotiert.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Immunogendesign: Das rekombinante Immunogen deckt die Aminosäuren 1–100 des humanen EMC4 (N-terminaler Bereich) ab. Es empfiehlt sich, die Antikörperreaktivität gegen das endogene Volllängenprotein zu überprüfen, da dieser Bereich sowohl strukturierte als auch ungeordnete Elemente enthalten kann.
• Western Blot: Der Antikörper detektiert Banden um 15 kDa, 16 kDa und 20 kDa, was wahrscheinlich auf posttranslationale Modifikationen oder Isoformunterschiede zurückzuführen ist. Validieren Sie diese Muster in Ihrem spezifischen Probensystem.
• IHC-P: Antigen-Retrieval und Detektionsbedingungen müssen für jeden Gewebetyp optimiert werden. Kein Protokoll ist universell anwendbar; Pilotstudien werden empfohlen.
• ELISA: Geeignet für Standardassay-Formate; dennoch müssen Beschichtungsbedingungen und Detektionsbereiche empirisch ermittelt werden.
• Kreuzreaktivität: Der Antikörper kreuzreagiert mit EMC4 von Maus und Ratte, aber die optimalen Arbeitsverdünnungen können zwischen den Spezies variieren. Eine Titration wird empfohlen.
• Allgemeiner Hinweis: Alle Experimente sollten geeignete Positiv- und Negativkontrollen zur Bestätigung der Spezifität enthalten.

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