Anti-EIF5B polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - O60841

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: EIF5B-Funktion und Lokalisierung

• EIF5B (eukaryotischer Translationsinitiationsfaktor 5B), auch bekannt als IF2, ist ein ~139 kDa großes GTP-bindendes Protein aus der Familie der Translationsinitiationsfaktoren.
• Es wirkt als ribosom-abhängige GTPase und fördert das Anfügen der 60S-ribosomalen Untereinheit an den Prä-Initiation-Komplex, um den 80S-Initiation-Komplex zu bilden. Verwandte Referenzen: PMID:10659855 PMID:35732735
• Zusammen mit eIF1A (EIF1AX) richtet es das Initiator-Methionin-tRNA in einer Konformation aus, die das Anfügen der 60S-Untereinheit ermöglicht. Verwandte Referenzen: PMID:12569173 PMID:35732735
• Die GTP-Hydrolyse ist essentiell für die Ausstoßung von eIF1A und die anschließende Freisetzung von EIF5B, was die Bildung elongationskompetenter Ribosomen ermöglicht. Verwandte Referenzen: PMID:10659855 PMID:35732735
• EIF5B ist im Zytoplasma lokalisiert.
• Es ist ein Phosphoprotein und Metall-bindendes Protein mit kritischen Rollen in der Proteinbiosynthese.
• Im Gegensatz zu seinem prokaryotischen Homolog fördert EIF5B nicht die Rekrutierung von Met-tRNA zur kleinen ribosomalen Untereinheit. Verwandte Referenzen: PMID:10659855

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (aa 1–273) von humanem EIF5B. Bedenken Sie, dass der Antikörper möglicherweise die vollständige Länge von EIF5B und möglicherweise N-terminale Fragmente oder Isoformen detektiert.
• Für Western Blotting (WB) verwenden Sie geeignete positive Kontrollen (z.B. HeLa-, HEK293- oder andere Zelllinien, die EIF5B exprimieren) und validieren Sie die Bandspezifität mit Molekulargewichtsmarkern (erwartet ~139 kDa). Passen Sie die Primärantikörper-Verdünnung basierend auf initialen Titrationsexperimenten an.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) schließen Sie Permeabilisierungsschritte ein und erwägen Sie eine Co-Färbung mit Organellenmarkern, um die zytoplasmatische Lokalisierung zu bestätigen.
• Für ELISA optimieren Sie die Beschichtungsantigen- und Detektionsbedingungen; der Antikörper kann je nach Assay-Format als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden.

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