Anti-EIF5A2 polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q9GZV4

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: EIF5A2-Funktion und Lokalisierung

• Kodiert für den eukaryotischen Translationsinitiationsfaktor 5A-2 (eIF5A2), ein hochkonserviertes Protein, das die Translationselongation und -termination erleichtert, insbesondere an Ribosomen, die an Polyprolin-Motiven und anderen anspruchsvollen Sequenzen pausieren. Verwandte Referenzen: PMID:14622290
• Fungiert als Ribosomen-Qualitätskontroll-(RQC)-Kofaktor, unterstützt die Peptidyltransferierung während des CAT-Tailings an pausierten Ribosomen und ist auch am mRNA-Abbau und stressresponsiven Zellwandintegritätswegen beteiligt (By similarity).
• Die eIF5A-Familie umfasst zwei Isoformen beim Menschen: EIF5A1 (konstitutiv exprimiert) und EIF5A2 (oft in Krebserkrankungen übersprimiert), die beide eine posttranslationale Hypusinierung für ihre Aktivität benötigen.
• Die subzelluläre Lokalisation erstreckt sich auf das Zytoplasma, den Zellkern und die endoplasmatische Retikulummembran, was mit seinen Rollen in der Translation, dem Kernexport von mRNAs und co-translationalen Prozessen übereinstimmt.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen die Hypusinbildung (essentiell für die Aktivität) und Acetylierung, mit zusätzlicher RNA-Bindungsfähigkeit; das reife Protein ist etwa 17 kDa groß.
• Die Gewebeexpressionsanalyse zeigt hohe Spiegel im Hoden, während eine Überspression in Ovarial-, Kolorektal- und anderen Krebszelllinien dokumentiert wurde, was mit einer schlechten Prognose korreliert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht dem Voll-Längen-Protein (aa 1-153) und deckt die N-terminale Domäne ab, die für die Ribosomenbindung und Hypusinierung kritisch ist; dieses Design unterstützt den Nachweis sowohl der Vorläufer- als auch der reifen Formen in denaturierenden Gelen.
• Für Western Blot sollten Gesamtzell- oder Gewebelysate unter reduzierenden Bedingungen aufgetrennt werden; EIF5A2 wandert bei etwa 17 kDa, und Ladekontrollen im Bereich von 15–20 kDa werden empfohlen.
• Überprüfen Sie die Reaktivität in Ihrem Probensystem: Von diesem Antikörper wird erwartet, dass er mit humanem, Maus- und Ratten-EIF5A2 kreuzreagiert, aber die endogene Expression kann variieren; bestätigen Sie dies mit positiven und negativen Kontrollen.
• Für ELISA-Anwendungen kann die Verwendung von gereinigtem rekombinantem EIF5A2 als Standard und das Titrieren der Antikörperkonzentrationen zur Optimierung des Signal-Rausch-Verhältnisses von Vorteil sein.

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