Anti-EIF5 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – P55010

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des Eukaryotischen Translationsinitiationsfaktors 5 (eIF5)

• Der eukaryotische Translationsinitiationsfaktor 5 (eIF5) wird vom EIF5-Gen kodiert und ist ein zentraler Bestandteil des 43S-Präinitiationskomplexes (43S PIC), der die 5'-untranslatierte Region der mRNA scannt, um das Startcodon zu lokalisieren. Verwandte Referenzen: PMID:11166181, PMID:22813744, PMID:24319994
• Innerhalb des 43S PIC wirkt eIF5 als GTPase-aktivierendes Protein (GAP), das die GTP-Hydrolyse durch die eIF2-Gamma-Untereinheit (EIF2S3) stimuliert. Verwandte Referenzen: PMID:11166181
• Während des Scans interagiert die N-terminale Domäne (NTD) von eIF5 mit EIF1A, während seine C-terminale Domäne (CTD) an EIF1 bindet. Dies trägt dazu bei, EIF1 in der offenen PIC-Konformation zu halten. Verwandte Referenzen: PMID:22813744, PMID:24319994
• Nach Erkennung des Startcodons löst die eIF5-NTD die GTP-Hydrolyse von eIF2γ aus, induziert einen geschlossenen PIC-Zustand, der die Affinität der CTD für EIF2β erhöht, EIF1 freisetzt und den geschlossenen Komplex stabilisiert. Verwandte Referenzen: PMID:11166181, PMID:22813744
• eIF5 lokalisiert überwiegend im Zytoplasma, wo die Translationsinitiation stattfindet.
• Das Protein hat ein theoretisches Molekulargewicht von etwa 49 kDa und unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Phosphorylierung und Ubiquitinierung.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Für Western Blotting (WB) empfehlen sich eine Gesamtprotein-Beladungskontrolle und die Optimierung der Verdünnung des primären Antikörpers ausgehend von der ungefähren Zielbandengröße von 49 kDa.
• Bei der Durchführung von Immunfluoreszenz (IF/ICC) schließen Sie geeignete Permeabilisierungs- und Blockierungsschritte ein; validieren Sie die Antikörperspezifität in der relevanten Spezies (Mensch, Maus, Ratte).
• Für ELISA verwenden Sie das rekombinante EIF5-Immunogen (Aminosäuren 1–235) als Positivkontrolle zur Erstellung einer Standardkurve.
• Der Antikörper wurde gegen den N-terminalen Bereich des humanen Volllängen-EIF5 (Aa 1–235) erhoben; bestätigen Sie die Reaktivität in Ihrem Probensystem und berücksichtigen Sie Kreuzreaktivitäten mit anderen eIF5-Familienmitgliedern.

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