Anti-eIF4EBP1 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für IHC-P und ELISA - Q13541

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von eIF4EBP1

• Das eukaryotische Translationsinitiationsfaktor 4E-Bindeprotein 1 (eIF4EBP1), auch bekannt als PHAS-I, ist ein zentraler Repressor der cap-abhängigen Translationsinitiation. Es wirkt, indem es an die eIF4E-Untereinheit bindet und deren Assemblierung in den eIF4F-Komplex verhindert.
• Hypophosphoryliertes eIF4EBP1 konkurriert mit dem Gerüstprotein eIF4G um eine gemeinsame Bindungsstelle an eIF4E und hemmt dadurch die Translation. Eine Hyperphosphorylierung als Reaktion auf Wachstumsfaktoren, Hormone oder Nährstoffe löst eIF4EBP1 von eIF4E ab, was die Bildung des eIF4F-Komplexes und die Translationsinitiation ermöglicht.
• Die Aktivität von eIF4EBP1 wird primarily über die mTORC1- und MAP-Kinase-Signalwege reguliert, die extrazelluläre und intrazelluläre Signale integrieren, um die Proteinsynthese zu steuern.
• eIF4EBP1 befindet sich überwiegend im Zytoplasma, kann aber auch im Kern nachgewiesen werden – was mit seinen Rollen bei der Translationsregulation und möglicherweise dem Export von eIF4E übereinstimmt.
• Posttranslationale Modifikationen, insbesondere Phosphorylierung an mehreren Stellen, Acetylierung und Ubiquitinierung, modulieren dynamisch seine Affinität zu eIF4E und seine regulatorischen Funktionen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen wurde gegen die N-terminale Region (Aminosäuren 1-118) von humanem eIF4EBP1 entwickelt, die einen für die eIF4E-Bindung und die phosphorylierungsabhängige Regulation kritischen Bereich abdeckt. Dies deutet darauf hin, dass der Antikörper sowohl phosphorylierte als auch unphosphorylierte Formen erkennen kann, aber eine Validierung im relevanten Probenystem wird empfohlen.
• Für IHC-P-Anwendungen berücksichtigen Sie Antigen-Retrieval-Bedingungen, die für nukleäre und zytoplasmatische Antigene geeignet sind, und schließen Sie geeignete Gewebekontrollen ein (z. B. Gewebe mit bekannter hoher/niedriger eIF4EBP1-Expression). Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte deutet auf eine potenzielle Eignung für diese Spezies hin.
• Für ELISA verwenden Sie rekombinantes eIF4EBP1-Protein oder Zelllysate als Beschichtungsantigene und testen Sie Antikörperverdünnungen im Schachbrettformat. Da es sich um einen polyclonalen Kaninchen-pAb handelt, kann das Signal zwischen Chargen variieren.
• Als polyclonaler Antikörper bietet er eine breite Epitoperkennung, was für den Nachweis mehrerer Isoformen oder Modifikationen vorteilhaft sein kann, er erfordert aber möglicherweise auch sorgfältige Blockierung und Auswahl des Sekundärantikörpers, um Hintergrundsignale zu minimieren.

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