Anti-eIF4EBP1 Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q13541

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von eIF4EBP1

• eIF4EBP1 ist ein Repressor der Translationsinitiation, der mit eIF4G1/eIF4G3 um die Bindung an das mRNA-Cap-bindende Protein eIF4E konkurriert. Hypophosphoryliertes eIF4EBP1 bindet fest an eIF4E, verhindert dessen Einbau in den eIF4F-Komplex und hemmt die Cap-abhängige Translation.
• Die Hyperphosphorylierung von eIF4EBP1 als Reaktion auf Stimuli wie Wachstumsfaktoren und Hormone führt zu seiner Dissoziation von eIF4E, was den eIF4F-Zusammenbau und die Translationsinitiation ermöglicht. Diese Regulation umfasst die MAP-Kinase- und mTORC1-Signalwege.
• Auch bekannt als PHAS-I (phosphoryliertes, hitze- und säurestabiles, durch Insulin reguliertes Protein 1), ist eIF4EBP1 ein Schlüsselvermittler, der extrazelluläre Signale mit der Kontrolle der Proteinsynthese verknüpft.
• Das Protein ist sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern lokalisiert, was mit seiner Rolle bei der Regulation der Translation und möglicherweise anderen nukleären Funktionen übereinstimmt.
• eIF4EBP1 unterliegt zahlreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität und Stabilität feinabstimmen.
• Als Mitglied der eIF4E-bindenden Proteinfamilie weist eIF4EBP1 strukturelle und funktionelle Ähnlichkeiten mit anderen 4E-BPs auf, zeigt jedoch ausgeprägte regulatorische Merkmale.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (AS 1-100) des humanen eIF4EBP1; daher erkennt der Antikörper möglicherweise bevorzugt das Volllängenprotein und N-terminale Fragmente. Erwägen Sie eine Antigen-Demaskierung oder denaturierende Bedingungen für eine optimale Exposition, falls interne Epitope in fixierten Proben adressiert werden sollen.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von eIF4EBP1 ~13 kDa, jedoch können posttranslationale Modifikationen (z. B. Phosphorylierung) zu mehreren Banden oder Verschiebungen führen. Validieren Sie dies im relevanten Probensystem und fügen Sie Phosphatase-Inhibitoren hinzu, falls der Phosphorylierungsstatus kritisch ist.
• Für Immunfluoreszenz/ICC führen Sie eine geeignete Fixierung und Permeabilisierung durch, um Zugang zu zytoplasmatischen und nukleären Pools zu erhalten. Fügen Sie Kontrollen hinzu, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für ELISA paaren Sie den Antikörper mit einem geeigneten Fänger- oder Detektionsantikörper, um einen Sandwich-Assay aufzubauen, wobei die erkannte lineare Epitopregion zu berücksichtigen ist.

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