Anti-eIF4E-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P06730

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: eIF4E-Funktion und Lokalisierung

• Der eukaryotische Translationsinitiationsfaktor 4E (eIF4E) ist auch als eIF-4F 25 kDa-Untereinheit oder mRNA-Kappenbindungsprotein bekannt, kodiert durch das EIF4E-Gen. Es ist ein zentraler Regulator der Proteinsynthese.
• Erkennt und bindet die 7-Methylguanosin (m7G)-Kappe am 5'-Ende von mRNAs als Kernkomponente des eIF4F-Komplexes, erleichtert das Entwinden von mRNA-Sekundärstrukturen und die Rekrutierung von Ribosomen für die Translationsinitiation. Verwandte Referenzen: PMID:16271312 PMID:22578813
• Vermittelt den Kernexport einer Untergruppe von mRNAs, einschließlich Cyclin D1 (CCND1), NOS2 und MDM2, durch Erkennung des 4ESE-Elements und den Aufbau eines Transportkomplexes, der LRPPRC und XPO1 umfasst. Verwandte Referenzen: PMID:23471078 PMID:22684010
• Funktioniert bei der translationalen Repression als Teil des CYFIP1-EIF4E-FMR1-Komplexes und beteiligt sich an der Speicherung von translational inaktiven mRNAs in cytoplasmatischen Processing-Körpern (P-Bodies). Verwandte Referenzen: PMID:24335285
• Spielt nicht-kanonische Rollen im Zellkern, fördert die Kappenmethylierung, das Pre-mRNA-Spleißen und die 3'-End-Verarbeitung, teilweise durch Erleichterung des Exports und der Translation von RNAs, die für Kappungs- und Spaltungsfaktoren kodieren. Verwandte Referenzen: PMID:11606200 PMID:22578813 PMID:22684010
• Unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Phosphorylierung und Acetylierung, die seine Aktivität modulieren; wurde in die Spermatogenese und anti-apoptotische Signalübertragung durch Regulation des spezifischen mRNA-Transports und der Translation involviert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht dem humanen eIF4E-Protein in voller Länge (Aminosäuren 1–217). Von diesem Antikörper wird erwartet, dass er endogenes eIF4E bei etwa 25 kDa in humanen Proben detektiert.
• Für Western Blot (WB) sollten Sie Ganzzelllysate von HeLa-, HEK293- oder Jurkat-Zellen als positive Kontrollen in Betracht ziehen. Ein Verdünnungsbereich von 1:500–1:2000 ist für polyklonale Antikörper üblich, aber eine Optimierung wird empfohlen.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) lokalisiert eIF4E hauptsächlich im Zytoplasma, mit möglicher Kern- und P-Body-Färbung in Abhängigkeit von Zelltyp und Bedingungen; validieren Sie die Färbemuster in Ihrem spezifischen System.
• Für ELISA-Anwendungen kann dieser Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; titrieren Sie, um die optimale Arbeitskonzentration für Ihr Assay-Format zu bestimmen.

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