Anti-eIF4A3 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P38919

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: eIF4A3-Funktion und -Lokalisierung

• Das vom EIF4A3-Gen codierte Protein ist auch bekannt als ATP-abhängige RNA-Helikase DDX48, Kernmatrixprotein 265 (NMP265) und eukaryotischer Initiationsfaktor 4A-III.
• Es ist ein integraler Bestandteil des Spleißosoms und essentiell für das prä-mRNA-Spleißen. Verwandte Referenzen: PMID:11991638, PMID:22961380, PMID:28076346
• Es wirkt als ATP-abhängige RNA-Helikase und erleichtert das ATP-abhängige Abwickeln von RNA-Sekundärstrukturen während des prä-mRNA-Spleißens und anderer Prozesse. Verwandte Referenzen: PMID:16170325
• Es ist eine Kernkomponente des Exon-Junction-Komplexes (EJC), der an mRNA an Spleißstellen abgeladen wird, um Exon-Exon-Grenzen zu markieren und post-spleißende Prozesse wie den Kernexport, die subzelluläre Lokalisierung, die Translationseffizienz und den Nonsense-vermittelten mRNA-Abbau (NMD) zu beeinflussen. Verwandte Referenzen: PMID:16170325, PMID:16209946, PMID:16314458
• Die Helikaseaktivität wird durch CASC3 stimuliert und durch das MAGOH-RBM8A-Heterodimer gehemmt, welches den EJC auf gespleißter mRNA in einer ATP-gebundenen Konformation stabilisiert.
• Es moduliert das alternative Spleißen von Apoptosegenen wie BCL2L1 und hemmt die Produktion der pro-apoptotischen Bcl-X(S)-Isoform. Verwandte Referenzen: PMID:22203037
• Es ist an der kraniofazialen Entwicklung beteiligt. Verwandte Referenzen: PMID:24360810
• Subzellulär lokalisiert es sich im Kern, in Nukleoplasma-Speckles und im Zytoplasma. Es ist ubiquitär exprimiert und unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 34–125 von menschlichem eIF4A3; daher erkennt der Antikörper wahrscheinlich eine konservierte N-terminale Epitopregion. Erwägen Sie die Überprüfung der Spezifität mit rekombinantem Protein oder Lysaten aus eIF4A3-überexprimierenden Zellen.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~47 kDa. Verwenden Sie Ganzzelllysate von menschlichen (HeLa, HEK293), murinen oder rattigen Zelllinien als positive Kontrollen. Validieren Sie dies in Ihrem spezifischen Probensystem.
• Bei der Immunfluoreszenz/ICC ist eine nukleäre (mit geflecktem Muster) und möglicherweise zytoplasmatische Färbung zu erwarten. Kollokalisationsstudien mit Spleißosom- oder EJC-Markern können die Zielspezifität bestätigen.
• Für ELISA kann der Antikörper mit dem Immunogen oder gereinigtem eIF4A3-Protein verwendet werden. Ermitteln Sie empirisch optimale Beschichtungs- und Nachweisbedingungen.

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