Anti-eIF4A1 Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - P60842

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: eIF4A1-Funktion und -Lokalisierung

• Der eukaryotische Initiationsfaktor 4A-I (eIF4A1) ist eine ATP-abhängige RNA-Helikase, die als Untereinheit des eIF4F-Komplexes dient und eine zentrale Rolle bei der cap-abhängigen Translationsinitiation spielt.
  Verwandte Referenzen: PMID:20156963
• eIF4A1 löst RNA-Sekundärstrukturen innerhalb der 5'-UTR von mRNAs auf, erleichtert die ribosomale Bindung und das Scannen nach dem Startcodon – ein Prozess, der die Zellproliferation und das Wachstum fördert.
  Verwandte Referenzen: PMID:20156963
• Alternativnamen umfassen DDX2A, EIF4A, eIF-4A, eIF4A-I und eIF-4A-I, was seine Klassifizierung als DEAD-Box-RNA-Helikase widerspiegelt.
• Das Protein kommt vorwiegend im Zytoplasma vor, einschließlich der perinukleären Region, und kann auch an die Zellmembran und Stress-Granula lokalisiert werden.
• eIF4A1 unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung (Ubl-Konjugation), die wahrscheinlich seine Funktion und Wechselwirkungen regulieren.
• Es nimmt an Wirt-Virus-Interaktionen teil, was seine Rolle bei zellulären Abwehrmechanismen unterstreicht.
• Als Schlüsselinitiationsfaktor für die Proteinbiosynthese wurde eIF4A1 in zahlreichen Proteomik-Studien identifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die N-terminale Region (Aminosäuren 1–100) abdeckt. Dieses Design liefert oft eine hohe Spezifität; jedoch sollte die Kreuzreaktivität mit anderen eIF4A-Isoformen oder Mitgliedern der DEAD-Box-Familie bei Bedarf überprüft werden.
• Für Western Blotting beträgt das erwartete Molekulargewicht ca. 46 kDa. Verwenden Sie geeignete Positivkontrollen-Lysate (z. B. HeLa, HEK293) und validieren Sie die Bandspezifität durch siRNA-Knockdown oder Wettbewerb mit dem Immunisierungspeptid.
• Optimieren Sie bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen je nach Probentyp. Zytoplasmische und perinukleäre Färbungen werden erwartet, aber eine Lokalisierung in Stress-Granula kann unter Stressbedingungen beobachtet werden.
• Für die Immunpräzipitation bestätigen Sie die Effizienz durch Blotting mit einem alternativen eIF4A1-Antikörper oder durch Massenspektrometrie.
• Die ELISA-Leistung kann unter Verwendung von rekombinantem Protein oder peptidbeschichteten Platten bewertet werden; titrieren Sie den Antikörper, um ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis zu erzielen.

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