Anti-eIF3B Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P55884

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: eIF3B-Funktion und -Lokalisierung

• Eukaryotischer Translationsinitiationsfaktor 3-Untereinheit B (eIF3B), auch bekannt als PRT1, EIF3S9, eIF3-p110 oder eIF3-p116, ist eine Kernkomponente des eukaryotischen Translationsinitiationsfaktor-3-Komplexes (eIF-3), der eine kritische Rolle bei der Proteinsynthese spielt, indem er die Translation einer Teilmenge von mRNAs zielt und initiiert, die an Zellproliferation, Zellzyklus, Differenzierung und Apoptose beteiligt sind.
• Der eIF-3-Komplex ist für mehrere Schritte der Translationsinitiation erforderlich: Er assoziiert mit der 40S-ribosomalen Untereinheit, um die Rekrutierung von Initiationsfaktoren zu erleichtern, stimuliert die mRNA-Rekrutierung und das Scannen zur AUG-Erkennung und ist für den Abbau und das Recycling von post-terminierenden ribosomalen Komplexen unerlässlich, um ein vorzeitiges Zusammenkommen der Untereinheiten zu verhindern. Verwandte Referenzen: PMID:17581632 PMID:9388245
• eIF3B ist eine wichtige RNA-bindende Untereinheit, die es dem eIF-3-Komplex ermöglicht, durch die Verwendung verschiedener Modi der RNA-Stem-Schleifen-Bindung spezifisch die Translation von zellproliferationsbezogenen mRNAs zu regulieren, wobei sie als translationaler Aktivator oder Repressor wirkt. Verwandte Referenzen: PMID:25849773
• Im Zusammenhang mit einer Infektion mit dem felinen Calicivirus (FCV) nimmt eIF3B an dem ribosomalen Terminations-Reinitiations-Ereignis teil, das die Translation des viralen VP2-Proteins steuert, was seine Rolle bei Wirt-Pathogen-Interaktionen hervorhebt. Verwandte Referenzen: PMID:18056426
• Subzellulär ist eIF3B überwiegend zytoplasmatisch und kann in Stress-Granula lokalisiert werden, membranlose Organellen, die unter zellulären Stressbedingungen entstehen, um mRNAs vorübergehend zu speichern und die Translation zu regulieren.
• eIF3B unterliegt post-translationalen Modifikationen, einschließlich Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität und Wechselwirkungen innerhalb der Translationsinitiationsmaschinerie modulieren können.
• Strukturell enthält eIF3B WD-Wiederholdomänen und gehört zur Familie der WD-Wiederholproteine, die für die Förderung von Protein-Protein-Wechselwirkungen und die Bildung von propellerartigen Strukturen bekannt sind, was mit seiner Rolle bei der Zusammenstellung des Multi-Untereinheiten-eIF-3-Komplexes übereinstimmt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western-Blot-Anwendungen ist ein dominantes Band bei ca. 93 kDa zu erwarten, das dem全长-eIF3B entspricht; erwägen Sie die Verwendung einer Ladungskontrolle und die Normalisierung der Signale über die Proben hinweg.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) zeigt eIF3B eine zytoplasmatische Verteilung; eine Permeabilisierung mit Detergenzien wie Triton X-100 oder Saponin ist erforderlich, und die Färbung kann unter Bedingungen von zellulärem Stress in Stress-Granula lokalisiert werden.
• Der Antikörper zeigt Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-Homologen; es wird jedoch empfohlen, die Bindungsspezifität und Leistung in diesen Spezies unter Verwendung geeigneter positiver und negativer Kontrollen zu validieren.
• Für ELISA titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Arbeitskonzentration zu bestimmen; erwägen Sie je nach Anforderung und Empfindlichkeit des Tests ein direktes oder Sandwich-ELISA-Format.
• Da das Immunogen einem rekombinanten Fragment (Aminosäuren 101–200) entspricht, erkennt der Antikörper wahrscheinlich ein konserviertes lineares Epitop im N-terminalen Bereich; er kann für Anwendungen geeignet sein, die denaturierte Proteine erfordern, obwohl die Erkennung der nativen Konformation empirisch verifiziert werden sollte.

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