Anti-eIF3B Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P55884

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: eIF3B-Funktion und -Lokalisierung

• eIF3B ist eine Kernuntereinheit des eukaryotischen Translationsinitiationsfaktor-3-(eIF-3)-Komplexes, der für mehrere Schritte bei der Einleitung der Proteinsynthese essentiell ist, einschließlich der Bildung des 43S-Präinitiationskomplexes, der Rekrutierung und des Scannings von mRNA sowie der Disassemblierung und dem Recycling von post-terminatorischen ribosomalen Komplexen. Verwandte Referenzen: PMID:17581632 PMID:25849773 PMID:27462815 PMID:9388245
• Der eIF-3-Komplex zielt spezifisch auf eine Teilmenge von mRNAs ab, die an Zellproliferation, Differenzierung und Apoptose beteiligt sind, und reguliert deren Translation, wobei verschiedene RNA-Stem-Schleifen-Bindungsmodi eingesetzt werden, um die Translation zu aktivieren oder zu reprimieren. Verwandte Referenzen: PMID:25849773
• eIF3B ist ein RNA-bindendes Protein, das zur Rekrutierung von Initiationsfaktoren (eIF-1, -1A, -2:GTP:Met-tRNAi, -5) an die ribosomale 40S-Untereinheit beiträgt und die Bildung des 43S-Präinitiationskomplexes erleichtert. Verwandte Referenzen: PMID:17581632 PMID:25849773 PMID:27462815
• Subzellulär kommt eIF3B im Zytoplasma vor und kann in Stressgranula lokalisiert werden, was auf eine Rolle bei der Translationskontrolle unter Stressbedingungen hindeutet.
• Im Kontext mikrobieller Infektionen spielt eIF3B eine Rolle bei der Translation des felinen Calicivirus (FCV), indem es an einem ribosomalen Terminations-Reinitiations-Ereignis teilnimmt, das zur Synthese des VP2-Proteins führt. Verwandte Referenzen: PMID:18056426
• Posttranslationale Modifikationen von eIF3B umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Funktion oder die Komplexassemblierung regulieren können.
• Das Protein ist durch das Vorhandensein von WD-Repeats gekennzeichnet, die an Protein-Protein-Interaktionen beteiligt sind, und es unterliegt alternatives Spleißen, wodurch Isoformen entstehen.
• eIF3B ist auch bekannt als PRT1-Homolog, eIF3S9, eIF-3-eta, eIF3 p110 und eIF3 p116. Das berechnete Molekulargewicht beträgt ca. 92,5 kDa, aber es wandert im SDS-PAGE bei etwa 93 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für das Western Blotting wird eine Bande von ca. 93 kDa erwartet. Erwägen Sie die Verwendung von Ganzzelllysaten oder zytoplasmatischen Extrakten aus menschlichen, murinen oder Rattenproben und fügen Sie geeignete positive und negative Kontrollen hinzu, um die Spezifität zu bestätigen.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) sorgen Sie für eine ordnungsgemäße Zellfixierung und -permeabilisierung. Die Färbung ist vorwiegend zytoplasmatisch; unter Stressbedingungen kann eIF3B in Stressgranula lokalisiert werden, daher sollten Sie erwägen, Stress zu induzieren, um die Granulabildung zu beobachten.
• Für ELISA-Anwendungen kann die polyklonale Natur und die Erkennung mehrerer Epitope die Empfindlichkeit erhöhen, aber die Chargen-zu-Chargen-Variabilität sollte durch Standardisierung kontrolliert werden.
• Da dies ein gegen humanes eIF3B gerichteter Kaninchen-polyklonaler Antikörper ist, wird eine Validierung am endogenen Ziel im vorgesehenen Probesystem empfohlen, insbesondere beim Wechsel zwischen Spezies (Mensch, Maus, Ratte).
• Obwohl nicht in den Standardanwendungen aufgeführt, eignet sich der Antikörper möglicherweise für die Immunpräzipitation des eIF-3-Komplexes; dies muss jedoch empirisch getestet werden.

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