Anti-EIF3A polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q14152

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: EIF3A-Funktion und -Lokalisierung

• EIF3A ist eine RNA-bindende Komponente des eukaryotischen Translationsinitiationsfaktor-3 (eIF-3)-Komplexes, der für mehrere Schritte bei der Initiation der Proteinsynthese benötigt wird. Verwandte Referenzen: PMID:17581632, PMID:25849773
• Der eIF-3-Komplex, der EIF3A enthält, erleichtert die Rekrutierung von eIF-1, eIF-1A, eIF-2:GTP:Met-tRNAi und eIF-5 an die 40S-Ribosomenuntereinheit, um den 43S-Präinitiationskomplex (43S PIC) zu bilden. Verwandte Referenzen: PMID:17581632, PMID:25849773
• EIF3A stimuliert die mRNA-Rekrutierung zum 43S PIC und das Scannen zur AUG-Erkennung und wird für die Disassemblierung und das Recycling von Post-Terminations-Ribosomenkomplexen benötigt, wodurch ein vorzeitiges Zusammenfügen von 40S- und 60S-Untereinheiten verhindert wird. Verwandte Referenzen: PMID:11169732, PMID:17581632
• Diese Untereinheit erkennt spezifisch eine Teilmenge von mRNAs, die an Zellproliferation, -differenzierung und Apoptose beteiligt sind, und initiiert deren Translation, wobei sie verschiedene Modi der RNA-Stamm-Schleifen-Bindung nutzt, um translatorische Aktivierung oder Repression auszuüben. Verwandte Referenzen: PMID:25849773, PMID:27462815
• Während mikrobieller Infektionen ist EIF3A für die Initiation an viralen internen Ribosomen-Eintrittsstellen (IRES) vom Typ 1, wie z.B. von HCV, PV, EV71 oder BEV, essentiell und spielt eine Rolle beim Ribosomen-Terminierungs-Reinitiierungs-Ereignis für die FCV-VP2-Translation. Verwandte Referenzen: PMID:23766293, PMID:24357634, PMID:18056426
• EIF3A lokalisiert im Zytoplasma.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung; das Protein enthält Coiled-Coil- und RNA-Bindungsmotive und ist an Wirt-Virus-Interaktionen beteiligt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 1–250 am N‑Terminus von humanem EIF3A. Berücksichtigen Sie dies bei der Entwicklung komplementärer Nachweisreagenzien oder bei Epitop-Kartierungsstudien.
• Für Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~167 kDa. Verwenden Sie reduzierende SDS‑PAGE-Bedingungen und validieren Sie das beobachtete Bandenmuster in Ihren spezifischen Zell- oder Gewebelysaten.
• Für Immunzytochemie/Immunfluoreszenz (IF/ICC) sind Fixierung mit 4% Paraformaldehyd und Permeabilisierung mit 0,1–0,3% Triton X‑100 üblicherweise geeignet. Bestätigen Sie die optimalen Bedingungen in Ihrem zellulären Modell.
• Bei der Verwendung von ELISA sollten geeignete Beschichtungspuffer und Nachweissysteme optimiert werden. Erwägen Sie die Kombination mit einem validierten Capture-Antikörper für die Entwicklung eines Sandwich-ELISA.

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