Anti-EIF2AK1 Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q9BQI3

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von EIF2AK1

• EIF2AK1, auch bekannt als hämregulierter Inhibitor (HRI) oder hämkontrollierter Repressor (HCR), ist eine metabolische Stress-sensing Serin/Threonin-Kinase, die die α-Untereinheit des eukaryotischen Translationsinitiationsfaktors 2 (eIF-2α) an Serin 51 phosphoryliert. Diese Phosphorylierung wandelt eIF-2α in einen globalen Proteinsyntheseinhibitor um, wodurch die Cap-abhängige Translation abgeschwächt und die integrierte Stressantwort (ISR) eingeleitet wird.
  Verwandte Referenzen: PMID:32132706, PMID:32132707, PMID:37327776

• Als Häm-Sensor bindet EIF2AK1 Häm through eine Cystein-Thiolat- und Histidin-Stickstoff-Koordination mit mittlerer Affinität, wodurch die Kinase unter normalen Bedingungen inaktiv gehalten wird. Hämdepletion, wie bei Eisenmangel, hebt diese Hemmung auf, löst die ISR-Aktivierung aus und spielt eine entscheidende Rolle bei der Koordination der Hämoglobinsynthese in roten Blutkörperchen.

• Bei mitochondrialer Dysfunktion bindet die prozessierte Form von DELE1 (S-DELE1) direkt an EIF2AK1 und aktiviert es, was zu einer ATF4-vermittelten transkriptionellen Umprogrammierung führt. Dieser Weg fördert auch die PRKN-unabhängige Mitophagie durch eIF-2α-Phosphorylierung an geschädigten Mitochondrien.
  Verwandte Referenzen: PMID:32132706, PMID:32132707, PMID:37327776, PMID:38340717

• Das EIF2AK1-Gen unterliegt alternatives Spleißen, wodurch mehrere Protein-Isoformen entstehen. Das Protein ist posttranslational durch Phosphorylierung und Ubiquitin-ähnliche Konjugation modifiziert, wie phosphoproteomische und proteomische Studien zeigen.

• Die subzelluläre Lokalisierung ist in der aktuellen UniProt-Datenbank nicht explizit beschrieben; alle bekannten Substrate und funktionellen Partner lokalisieren jedoch im Zytoplasma, was mit seiner Rolle bei der Translationsregulation übereinstimmt.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Da das Immunogen den Resten 337–586 von menschlichem EIF2AK1 entspricht, die einen großen Teil der Kinasedomäne umfasst, erkennt dieser Antikörper wahrscheinlich sowohl volllängige als auch verkürzte Isoformen, bei denen diese Region erhalten ist. Für Western Blot (WB) sollten Sie die Lysatherstellung mit Phosphataseinhibitoren optimieren und die Detektion in Zelllinien mit bestätigter EIF2AK1-Expression validieren.
• In ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; die Paarung mit einem anderen Klon oder einem polyklonalen Detektionsantikörper kann die Assay-Empfindlichkeit verbessern. Validieren Sie den Assay in der relevanten Probematrix.
• Aufgrund der Bezeichnung [KD Validated] wurde der Antikörper in Knockdown-Proben getestet; eine vergleichende WB mit siRNA-behandelten vs. unbehandelten Zellen kann die Spezifität in Ihrem System weiter bestätigen.

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