Anti-eIF2A Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q9BY44

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: eIF2A-Funktion und Lokalisierung

• eIF2A (Eukaryotischer Translationsinitiationsfaktor 2A), auch als 65 kDa eukaryotischer Translationsinitiationsfaktor 2A bezeichnet, wird beim Menschen durch das EIF2A-Gen kodiert. Es hat ein Molekulargewicht von etwa 65 kDa (UniProt: 64990 Da).
• eIF2A wirkt in den frühen Schritten der Proteinsynthese für eine spezifische Untergruppe von mRNAs. Es vermittelt die Bindung von Methionyl-tRNAi an 40S-ribosomale Untereinheiten auf eine codonspezifische Weise, anders als der kanonische eIF-2-Komplex, der über GTP-abhängige Bindung arbeitet.
• Das Protein ist in Geweben weit verbreitet exprimiert, wobei höhere Expressionslevel in der Bauchspeicheldrüse, dem Herzen, dem Gehirn und der Plazenta beobachtet werden, was auf gewebespezifische Rollen bei der Translationsregulation hindeutet.
• Strukturelle Merkmale umfassen WD-Wiederholungen, die Protein-Protein-Interaktionen erleichtern, und eine Coiled-Coil-Domäne. eIF2A unterliegt alternativem Spleißen und posttranslationalen Modifikationen wie Acetylierung und Phosphorylierung.
• Es wird unter Initiationsfaktoren klassifiziert und ist an der Translationsregulation beteiligt. Die Proteomik-Identifizierung hat seine Anwesenheit in Referenzproteomen bestätigt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das aus der N-terminalen Region (Aminosäuren 1–100) von humanem eIF2A abgeleitet ist. Diese Region ist relativ konserviert; überprüfen Sie die Sequenzidentität über Spezies hinweg, wenn Kreuzreaktivität mit anderen Orthologen erwartet wird.
• Für Western Blotting sollten Antikörperverdünnungen ab 1:500 bis 1:2000 getestet und die Bandspezifität unter Verwendung von eIF2A-Knockdown- oder Knockout-Zelllysaten validiert werden. Endogenes eIF2A läuft bei ~65 kDa; stellen Sie sicher, dass die MW-Marker geeignet sind.
• Für ELISA-Anwendungen optimieren Sie die Beschichtungsantigen- und Antikörperkonzentrationen. Schließen Sie geeignete Kontrollen ein, um Hintergrundbindungen aufgrund der polyklonalen Natur des Antikörpers zu berücksichtigen.
• Angesichts der breiten Gewebeexpression von eIF2A wählen Sie für erste Experimente positive Kontrolllysate aus Geweben mit höherer Expression (z.B. Bauchspeicheldrüse, Gehirn).

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