Anti-eIF2α Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P05198

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: eIF2α-Funktion und -Lokalisierung

• eIF2α, codiert durch das EIF2S1-Gen, ist die Alpha-Untereinheit des eukaryotischen Translationsinitiationsfaktor-2 (eIF2)-Komplexes, auch bekannt als eIF-2A oder eIF-2alpha.
• Der eIF2-Komplex bildet einen ternären Komplex mit GTP und Initiator-tRNA, bindet an die ribosomale 40S-Untereinheit und erleichtert die mRNA-Anlagerung zur Bildung des 43S-Präinitiationskomplexes; nach dem Beitritt der 60S-Untereinheit führt die GTP-Hydrolyse zu einem eIF2-GDP-Komplex, der einen durch eIF2B katalysierten Nukleotidaustausch für das Recycling erfordert. Verwandte Referenzen: PMID:16289705 PMID:38340717
• eIF2α ist ein zentraler Regulator der integrierten Stressantwort (ISR): Phosphorylierung durch stresssensible Kinasen (EIF2AK1/HRI, EIF2AK2/PKR, EIF2AK3/PERK und EIF2AK4/GCN2) wandelt eIF2α in einen globalen Hemmer der Proteinsynthese um, dämpft die cap-abhängige Translation und fördert gleichzeitig die Translation von ISR-spezifischen mRNAs, wie den Transkriptionsaktivatoren ATF4 und QRICH1. Verwandte Referenzen: PMID:19131336 PMID:33384352 PMID:38340717
• Bei mitochondrialer Schädigung relokalisiert phosphoryliertes eIF2α an die mitochondriale Oberfläche und aktiviert eine PRKN-unabhängige Mitophagie. Verwandte Referenzen: PMID:38340717
• Subzellulär kommt eIF2α im Zytoplasma, Zytosol, Stressgranula und Mitochondrien vor, was seinen Rollen bei der Translation und Stresssignalgebung entspricht.
• Das Protein unterliegt Acetylierung und Phosphorylierung und wird als Initiationsfaktor, Phosphoprotein und RNA-bindendes Protein klassifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht dem N-terminalen Bereich (Aminosäuren 1–315) von humanem eIF2α, der für die Bildung des eIF2-Komplexes und die Phosphorylierungsstellen kritische Domänen enthält; dieses Design kann eine breite Reaktivität über Arten hinweg sowie die Erkennnung sowohl phosphorylierter als auch nicht-phosphorylierter Formen bieten.
• Für den Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~36 kDa; erwägen Sie die Verwendung geeigneter Gelkonzentrationen und fügen Sie relevante Kontrollen hinzu, wie z. B. Zelllysate, die mit Stressinduktoren (z. B. Thapsigargin, Tunicamycin) behandelt wurden, um potenzielle phosphorylierungsinduzierte Verschiebungen zu beobachten.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) und Immunhistochemie (IHC-P) validieren Sie die Färbemuster im Zytoplasma und in den Stressgranula unter normalen und Stressbedingungen; stellen Sie geeignete Permeabilisierungs- und Antigen-Retrieval-Protokolle sicher.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte deutet auf die Eignung für Nagetiermodelle hin; bestätigen Sie jedoch die Sequenzhomologie und validieren Sie im spezifischen experimentellen System.

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