Anti-EIF1AX Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P47813

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von EIF1AX

• EIF1AX ist das menschliche X-chromosomale Gen, das den eukaryotischen Translationsinitiationsfaktor 1A codiert, auch bekannt als eIF-4C.
• Funktioniert als Komponente des 43S-Präinitiationskomplexes (43S PIC), der an mRNA bindet und die 5'-UTR scannt, um das Startcodon zu lokalisieren. Zusammen mit EIF1 erleichtert es das mRNA-Scannen, die Erkennung des Startcodons und fördert die Assemblierung des 48S-Initiationskomplexes, während es auch abweichende Komplexe dissoziiert. Verwandte Referenzen: PMID:9732867
• Nach der Lokalisierung des Startcodons kooperiert es mit EIF5B, um das Initiator-Methionin-tRNA für die Verbindung der 60S-Ribosomenuntereinheit auszurichten und den 80S-Initiationskomplex zu bilden. Sein globulärer Teil befindet sich in der A-Stelle der 40S-Untereinheit. Verwandte Referenzen: PMID:35732735
• Wird nach der Bildung des 80S-Komplexes nach GTP-Hydrolyse durch EIF5B vor der Freisetzung von EIF5B vom Ribosom freigesetzt. Verwandte Referenzen: PMID:35732735
• Die Interaktion mit EIF5 während des Scannens hilft, EIF1 im offenen 43S PIC zu halten; im Gegensatz zu Hefe-Orthologen bindet menschliches EIF1AX EIF1 jedoch nicht direkt. Verwandte Referenzen: PMID:24319994
• Es ist im Zytoplasma lokalisiert, was mit seiner Rolle bei der Translationsinitiierung übereinstimmt.
• Schlüsselwörter sind: Initiationsfaktor, Proteinbiosynthese, RNA-bindend, tRNA-bindend und Wirt-Virus-Interaktion.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 10-144 von menschlichem EIF1AX ab, eine Region, die über Arten hinweg hoch konserviert ist; prüfen Sie bei Bedarf die Kreuzreaktivität mit anderen Säugetieren.
• Für Western Blot wird aufgrund des geringen Molekulargewichts (~16 kDa) ein 15%iges SDS-PAGE-Gel empfohlen. Verwenden Sie geeignete Beladungskontrollen und überprüfen Sie die Bandenspezifität mit Knockdown- oder Knockout-Proben.
• Bei IHC-P kann eine Antigen-Retrieval erforderlich sein; optimieren Sie Fixierungs- und Retrieval-Bedingungen für Ihren Gewebetyp. Fügen Sie positive und negative Kontrollen hinzu.
• Für IF/ICC ist die Permeabilisierung entscheidend für nukleäre/zytoplasmatische Ziele. Verwenden Sie 0,1–0,3 % Triton X-100 und validieren Sie den Antikörper in Ihrem Zellsystem.
• Es wurde berichtet, dass der Antikörper EIF1AX bei Mensch, Maus und Ratte erkennt; validieren Sie den Antikörper jedoch immer in der entsprechenden Spezies und unter dem jeweiligen experimentellen Kontext.

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